[發(fā)明專利]一種精卵體外結(jié)合受精的培養(yǎng)皿及使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910795566.0
• 申請(qǐng)日: 2019-08-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110343615B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 饒金鵬;金敏;金帆;封純;邱楓;魏凱;蔡益婷;田申;錢小紅;朱倩;金凱紅;毛愉嬋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;C12M1/22;C12N5/075;C12N5/076
• 代理公司: 上海千尋知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31353
• 代理人: 吳紅斐;吳小麗

本發(fā)明公開(kāi)了一種精卵體外結(jié)合受精的培養(yǎng)皿及使用方法，涉及輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域，所述培養(yǎng)皿包括基板和第一槽體，第一槽體內(nèi)設(shè)有突起，突起的頂面呈自中間向四周輻射且高度逐漸下降的曲面，且曲面向突起的底面方向突出；突起頂面的中間向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，卵子槽的槽口向上敞開(kāi)；曲面上沿徑向間隔設(shè)有若干個(gè)阻擋環(huán)，阻擋環(huán)與的第一槽體均同軸設(shè)置，阻擋環(huán)頂端的高度均低于卵子槽槽口的高度；位于最外側(cè)的阻擋環(huán)和第一槽體的內(nèi)壁在突起的頂面上圍合出用于添加精子的精子環(huán)槽。本發(fā)明可對(duì)精子進(jìn)行體外水平、垂直雙向的優(yōu)化選擇，有效減少卵子多精受精發(fā)生率的同時(shí)也提高了卵子的受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎形成率、臨床妊娠率。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種精卵體外結(jié)合受精的培養(yǎng)皿及使用方法。

背景技術(shù)

隨著國(guó)家全面“二孩”政策的放開(kāi)，國(guó)內(nèi)符合二孩標(biāo)準(zhǔn)的夫妻大約在9000萬(wàn)對(duì)，其中有6000萬(wàn)女性在35歲以上，且伴隨著環(huán)境污染、工作生活壓力大、年齡增大以及不良生活方式等因素的疊加影響，根據(jù)中國(guó)人口協(xié)會(huì)、國(guó)家計(jì)生委聯(lián)名發(fā)布的《中國(guó)不孕不育現(xiàn)狀調(diào)研報(bào)告》顯示，我國(guó)的不孕不育發(fā)病率在12.5％—15％，患者人數(shù)近4000萬(wàn)。若要實(shí)現(xiàn)生育的目的,最為有效的方式是借助以體外受精-胚胎移植(in?vitro?fertilization-embryotransfer,IVF-ET)為代表的輔助生殖技術(shù)(artificial?reproductive?technology，ART)。

ART涉及復(fù)雜多環(huán)節(jié)的實(shí)驗(yàn)室操作過(guò)程，但在諸多步驟中，體外受精(IVF)的操作無(wú)疑是整項(xiàng)技術(shù)的核心。當(dāng)遇到女方輸卵管性不孕、排卵障礙、子宮內(nèi)膜異位癥、免疫性不孕、男方輕度少弱畸精癥、原因不明性不孕等臨床適應(yīng)證時(shí)，會(huì)應(yīng)用常規(guī)體外受精技術(shù)(第一代試管嬰兒技術(shù))，使一定濃度的精子與卵子共同孵育并結(jié)合成為受精卵。但目前大多數(shù)生殖醫(yī)學(xué)中心采用的體外受精方式無(wú)外乎兩種：一種是將處理后的精子加入盛有卵子的四孔板或培養(yǎng)皿微滴內(nèi)，另一種是將卵子加入到已調(diào)好密度的精子培養(yǎng)液內(nèi)。但不論是哪種方法，都是采用了精子與卵子直接接觸的方式，這就導(dǎo)致了與卵子接觸的精子除了正常精子外還夾帶著沒(méi)有前向運(yùn)動(dòng)能力的精子或死精子，而即便是正常精子，其質(zhì)量也參差不齊(一些呈快速前向運(yùn)動(dòng)，另一些呈速度較慢的曲線運(yùn)動(dòng))，這就會(huì)產(chǎn)生與卵子結(jié)合的精子有可能為距離較近的質(zhì)量不佳的精子。此外，各大生殖醫(yī)學(xué)中心常規(guī)體外受精操作時(shí)，加入的精子數(shù)量通常為2000-20000條/卵不等，這大大高于自然受孕過(guò)程中到達(dá)受精部位并與卵子接觸的精子數(shù)量(幾十條甚至更少)，而高濃度的精子(包括死精)會(huì)產(chǎn)生代謝物甚至毒素，這都會(huì)對(duì)卵子的受精結(jié)局、胚胎后續(xù)的卵裂及發(fā)育造成不利影響，最終導(dǎo)致臨床妊娠率與胚胎種植率的降低。

自然受孕是一個(gè)精子經(jīng)歷漫長(zhǎng)的旅程尋找卵子的過(guò)程，這一過(guò)程經(jīng)歷了嚴(yán)格的自然生理性選擇，是一個(gè)淘汰絕大多數(shù)(幾千萬(wàn)甚至幾億)精子的優(yōu)勝劣汰的過(guò)程。體外受精技術(shù)自1978年產(chǎn)生全世界第一例試管嬰兒Louise?Brown至今也不過(guò)40多年歷史，雖然已經(jīng)幫助成千上萬(wàn)的患者解決了生育困難的問(wèn)題，但體外受精操作本身的安全性究竟如何，由于仍然缺乏足夠大樣本的子代安全性研究，目前學(xué)界仍無(wú)明確定論。而盡可能地減少體外操作的影響，使精子在體外得到水平方向及垂直方向的優(yōu)選,汰弱留強(qiáng)后再與卵子結(jié)合受精無(wú)疑是有利于產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)胚胎和健康子代的。

但本申請(qǐng)發(fā)明人在實(shí)現(xiàn)本申請(qǐng)實(shí)施例中技術(shù)方案的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)上述現(xiàn)有技術(shù)至少存在如下技術(shù)問(wèn)題：

由于精子沒(méi)有篩選，現(xiàn)有的精子與卵子直接接觸的精卵體外結(jié)合方式的多精受精發(fā)生率較高，但卵子正常受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎形成率、臨床妊娠率均較低。

申請(qǐng)內(nèi)容