[發明專利]一種精卵體外結合受精的培養皿及使用方法

有效

• 申請號: 201910795566.0
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110343615B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 饒金鵬;金敏;金帆;封純;邱楓;魏凱;蔡益婷;田申;錢小紅;朱倩;金凱紅;毛愉嬋
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/22;C12N5/075;C12N5/076
• 代理公司: 上海千尋知識產權代理事務所(普通合伙) 31353
• 代理人: 吳紅斐;吳小麗

1.一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述培養皿包括基板和若干個第一槽體，所述第一槽體設置在所述基板上，且所述第一槽體的開口向上敞開；

所述第一槽體是圓形槽，以所述第一槽體的中心軸方向為軸向，以所述第一槽體的直徑方向為徑向，所述第一槽體內同軸設有突起；所述突起的底面固定在所述第一槽體的內底面上，所述突起的頂面位于所述第一槽體內，所述突起的頂面呈自中間向四周輻射且高度逐漸下降的曲面，且所述曲面向所述突起的底面方向突出；所述突起頂面的中間向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，所述卵子槽的槽口向上敞開；

所述曲面上沿所述徑向間隔設有若干個阻擋環，所述的阻擋環與所述的第一槽體均同軸設置，所述阻擋環的底端固定在所述突起的頂面上，所述的阻擋環的頂端豎直向上延伸，且所述阻擋環頂端的高度均低于所述卵子槽槽口的高度；

位于最外側的所述阻擋環和所述第一槽體的內壁在所述突起的頂面上圍合出用于添加精子的精子環槽；

各所述阻擋環的頂端的高度沿所述徑向自外向內逐漸增高；

所述基板上還設有第二槽體，且所述第二槽體的開口向上敞開。

2.如權利要求1所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述第二槽體是圓形槽，且所述第二槽體的個數是一個。

3.如權利要求1所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述卵子槽下方的突起鏤空，所述卵子槽的槽底形成透明的觀察面。

4.如權利要求3所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述的基板透明。

5.如權利要求1所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述第一槽體的內壁上內設有液位刻度線，且所述液位刻度線位于所述卵子槽之上。

6.如權利要求1所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述卵子槽是圓形槽，且所述卵子槽與所述第一槽體同軸設置。

7.如權利要求6所述的一種精卵體外結合受精的培養皿，其特征在于，所述卵子槽的直徑不小于4mm。

8.如權利要求1至7任一項所述的一種精卵體外結合受精的培養皿的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟110：向所述第一槽體內加入受精培養液，且使所述受精培養液的液面位于所述液位刻度線處，再向所述受精培養液的上方加入石蠟油，以維持所述受精培養液的滲透壓和溫度的穩定，最后將所述培養皿置于培養箱中平衡；

步驟120：將卵冠丘復合物放在所述第二槽體中漂洗后得到卵子，然后將所述卵子分別置于所述卵子槽內，且每個卵子槽內放入1～10個卵子；

步驟130：將所述放有卵子的培養皿放回培養箱中孵育后，再將精液標本加入到所述精子槽中；

步驟140：位于下方且位于周邊的所述精子將向位于上方且位于中間的卵子槽游動，一些死精及原地運動的精子將首先滯留于所述精子槽內，而另一些活力較差的精子將被各阻擋環逐一擋下，只有兼具水平游動及垂直游動能力的優質精子，才能逐一翻過各阻擋環到達卵子槽，并與卵子進行結合受精，從而優選精子；

步驟150：將添加了卵子及精子的所述培養皿放入培養箱中孵育，完成整個體外結合受精過程。