[發(fā)明專利]一種室內(nèi)快速篩選防治玉米瘤黑粉病藥劑的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910753742.4
• 申請(qǐng)日: 2019-08-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110501295A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊云鶴;石潔;張海劍;郭寧;劉樹(shù)森;金戈
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;C12N1/14;C12Q1/18;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 11624 北京卓嵐智財(cái)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 王新月<國(guó)際申請(qǐng)>=<國(guó)際公布>=<進(jìn)入

1.一種室內(nèi)快速篩選玉米瘤黑粉病防治藥劑的方法，包括以下步驟：

1)配制一系列含有不同有效成分濃度待測(cè)藥劑的馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基，將活化的玉蜀黍黑粉菌菌株移入上述含藥培養(yǎng)基中，使得含藥培養(yǎng)基中孢子的濃度為1×10⁵-1×10⁶個(gè)/ml，用酶標(biāo)儀測(cè)量菌液在590nm處的初始吸光值OD₁；

2)將上述含有玉蜀黍黑粉菌菌株的液體培養(yǎng)基在黑暗條件下振蕩培養(yǎng)16-20h，用酶標(biāo)儀測(cè)量最終OD₂；

3)計(jì)算各處理菌液OD的增長(zhǎng)值ΔOD，計(jì)算抑制率；以殺菌劑有效成分濃度的對(duì)數(shù)值為自變量，抑制率幾率值為因變量，計(jì)算毒力回歸方程，并求出抑制中濃度EC₅₀。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述玉蜀黍黑粉菌菌株的活化步驟為：將玉蜀黍黑粉菌菌株接種在馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，在黑暗條件下振蕩活化培養(yǎng)得到活化菌株。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述振蕩活化培養(yǎng)的溫度為25℃-28℃，頻率為150-250r/min，時(shí)間為16-20h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中所述OD₂值的范圍在0.8-1之間。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中所述振蕩培養(yǎng)的溫度為25℃-28℃，頻率為150-250r/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)中所述抑制率按照下式計(jì)算：抑制率(％)＝[(對(duì)照菌液ΔOD-處理菌液ΔOD)/對(duì)照菌液ΔOD]*100％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基的組成成分及其重量比為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蒸餾水1000ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基的制備方法包括：將馬鈴薯去皮后切成小塊，放入蒸餾水中煮沸，紗布過(guò)濾后，按照比例加入葡萄糖，煮沸后蒸餾水定容至1000ml，分裝后滅菌。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述滅菌條件為：121℃滅菌20min。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶標(biāo)儀測(cè)量OD值重復(fù)2～4次。