[發(fā)明專利]一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因、克隆方法及其應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201910744077.2 | 申請(qǐng)日: | 2019-08-13 |
| 公開(公告)號(hào): | CN110295184A | 公開(公告)日: | 2019-10-01 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王崇;梁銀銓 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 水利部中國(guó)科學(xué)院水工程生態(tài)研究所 |
| 主分類號(hào): | C12N15/53 | 分類號(hào): | C12N15/53;C12N9/02 |
| 代理公司: | 北京金智普華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401 | 代理人: | 楊采良 |
| 地址: | 430078 湖北省武漢市*** | 國(guó)省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 裂腹魚 短須 克隆 銅鋅超氧化物歧化酶基因 超氧化物歧化酶基因 全序列 生物基因工程技術(shù) 超氧化物歧化酶 開放閱讀框 提取總RNA 第一條鏈 分子機(jī)理 中間序列 反轉(zhuǎn)錄 抗氧化 擴(kuò)增 拼接 肝臟 應(yīng)用 研究 | ||
1.一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因,其序列見SEQ ID NO.11。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因,其特征在于,所述基因序列共801bp,包括完全開放閱讀框465bp,5'端非編碼區(qū)為60bp,3'端非編碼區(qū)為276bp。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因,其特征在于,所述基因序列推導(dǎo)編碼的氨基酸序列見SEQ ID NO.12。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:提取總RNA并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA;
步驟2:根據(jù)已知的多種動(dòng)物Cu/Zn-SOD基因的保守區(qū)序列設(shè)計(jì)引物,PCR克隆Cu/Zn-SOD基因中間片段;
步驟3:獲取目標(biāo)基因5’端序列;
步驟4:獲取目標(biāo)基因3’端序列;
步驟5:將步驟2、步驟3和步驟4獲得的序列片段進(jìn)行拼接,獲得全長(zhǎng)序列。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法,其特征在于:步驟2中根據(jù)已知的多種動(dòng)物Cu/Zn-SOD基因的保守區(qū)序列設(shè)計(jì)的引物序列見SEQID NO.1和SEQ ID NO.2。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法,其特征在于:步驟3中涉及的引物序列見SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.6。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法,其特征在于:步驟4中涉及的引物序列見SEQ ID NO.8-SEQ ID NO.9。
8.如權(quán)利要求1-3任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因在短須裂腹魚超氧化物歧化酶相關(guān)研究中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求4-7任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法在短須裂腹魚超氧化物歧化酶相關(guān)研究中的應(yīng)用。
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