[發明專利]一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因、克隆方法及其應用在審
| 申請號： | 201910744077.2 | 申請日： | 2019-08-13 |
| 公開（公告）號： | CN110295184A | 公開（公告）日： | 2019-10-01 |
| 發明（設計）人： | 王崇;梁銀銓 | 申請（專利權）人： | 水利部中國科學院水工程生態研究所 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/02 |
| 代理公司： | 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401 | 代理人： | 楊采良 |
| 地址： | 430078 湖北省武漢市*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 裂腹魚 短須 克隆 銅鋅超氧化物歧化酶基因 超氧化物歧化酶基因 全序列 生物基因工程技術 超氧化物歧化酶 開放閱讀框 提取總RNA 第一條鏈 分子機理 中間序列 反轉錄 抗氧化 擴增 拼接 肝臟 應用 研究 | ||
1.一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因，其序列見SEQ ID NO.11。
2.根據權利要求1所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因，其特征在于，所述基因序列共801bp，包括完全開放閱讀框465bp，5'端非編碼區為60bp，3'端非編碼區為276bp。
3.根據權利要求1所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因，其特征在于，所述基因序列推導編碼的氨基酸序列見SEQ ID NO.12。
4.如權利要求1-3任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1：提取總RNA并逆轉錄為cDNA；
步驟2：根據已知的多種動物Cu/Zn-SOD基因的保守區序列設計引物，PCR克隆Cu/Zn-SOD基因中間片段；
步驟3：獲取目標基因5’端序列；
步驟4：獲取目標基因3’端序列；
步驟5：將步驟2、步驟3和步驟4獲得的序列片段進行拼接，獲得全長序列。
5.根據權利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步驟2中根據已知的多種動物Cu/Zn-SOD基因的保守區序列設計的引物序列見SEQID NO.1和SEQ ID NO.2。
6.根據權利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步驟3中涉及的引物序列見SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.6。
7.根據權利要求4所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步驟4中涉及的引物序列見SEQ ID NO.8-SEQ ID NO.9。
8.如權利要求1-3任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因在短須裂腹魚超氧化物歧化酶相關研究中的應用。
9.如權利要求4-7任一所述的一種短須裂腹魚銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆方法在短須裂腹魚超氧化物歧化酶相關研究中的應用。
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