[發明專利]一種靈芝發酵水飛薊新技術

在審

• 申請號: 201910733905.2
• 申請日: 2019-08-09
• 公開（公告）號: CN110507686A
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發明（設計）人: 杜新永;李先勝;馬如霞
• 申請（專利權）人: 青島潤達生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61K31/715;A61P1/16;C12P19/04;C12P17/16;C12N1/14;C12R1/645;A61K31/357
• 代理公司: 11335 北京匯信合知識產權代理有限公司
• 代理人: 陳圣清<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明公開了一種靈芝發酵水飛薊新技術，包括以下步驟：靈芝發酵前的準備、和靈芝發酵水飛薊獲取靈芝多糖?水飛薊素混合物。本發明通過提高培養基的pH值，一方面確保靈芝菌絲體生長不受影響；另一方面提高培養基pH值所得的水飛薊素含量比沒調pH值的高20%左右；本發明提供的新技術可一次性獲得兩種成分：靈芝多糖—水飛薊素混合物，方便且節能。

技術領域

本發明涉及一種靈芝發酵水飛薊新技術。

背景技術

靈芝屬擔子菌綱、多孔菌科、靈芝屬,是赤芝和紫芝的總稱,在我國入藥已達二千多年,是著名藥用真菌。東漢時期的《神農本草經》、明代著名醫藥學家李時珍的《本草綱目》,都對靈芝的藥用功效有著詳細的記載。現代醫學研究認為靈芝中的提取物具有多種生物活性,包括抗腫瘤、免疫調節、抗氧化、降血糖、抗衰老、保護肝臟、抗潰瘍等功效。由于靈芝特殊的藥用價值,靈芝有效成分的分析及其藥理作用研究受到廣泛的關注,其中以靈芝多糖的研究最為深入。

靈芝液體深層發酵技術是將靈芝菌種置于液體培養基，在適當的培養條件和參數下，通入無菌空氣于發酵罐，能保證靈芝菌絲體質量、數量及靈芝多糖含量的增加、且快速產生大量次級代謝產物的一種培養方式。與傳統農業法栽培靈芝子實體相比，液體深層發酵技術不僅能顯著提高靈芝多糖的含量，而且還能有效控制發酵條件，以保證液體培養始終在最佳條件進行。

上百年來，水飛薊素被用來治療肝臟、脾臟和膽囊部位的疾病。它的保肝活性、抗氧化性、抗癌活性、消炎活性和防糖尿病活巧逐漸被大家熟知。作為一種保肝藥劑，水飛薊素適用于口服治療毒性肝臟損傷和慢性肝炎疾病的治療。

黃酮類化合物因存在酚羥基結構，多為弱酸性，因此可用堿液對其進行提取。常用的堿性溶液有碳酸鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣等。在進行提取時，應當根據不同的實驗原料選擇適合的堿性溶液進行提取。

通過靈芝發酵水飛薊來獲得靈芝多糖和水飛薊素，綜合兩者的保肝功能與提高機體免疫力，來進一步應用于動物獸藥中。

發明內容

本發明的目的在于提供一種靈芝發酵水飛薊新技術，本發明通過提高培養基的pH值，一方面確保靈芝菌絲體生長不受影響；另一方面提高培養基pH值所得的水飛薊素含量比沒調pH值的高20％左右；本發明提供的新技術可一次性獲得兩種成分：靈芝多糖—水飛薊素混合物，方便且節能。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種靈芝發酵水飛薊新技術，包括以下步驟：靈芝發酵前的準備、和靈芝發酵水飛薊獲取靈芝多糖- 水飛薊素混合物。

其中，靈芝發酵前的準備，包括以下步驟：

(1)首先獲得靈芝原種；

(2)用PDA培養基對靈芝原種進行組織擴培：切取豆粒大小的靈芝組織塊于PDA培養基中，置于28℃恒溫箱中，直至菌絲體長滿PDA培養基，然后轉移至4℃冰箱中保存；

(3)一級靈芝菌絲體種子制備：將長滿PDA培養基的菌絲體，切成小塊，放在一級搖瓶培養基中，過程中搖瓶培養基保持無菌，將搖瓶放在搖床中，于27℃、150rpm/min，培養3天，獲得一級靈芝菌絲體種子；

(4)二級靈芝菌絲體種子制備：將步驟(3)所得一級靈芝菌絲體種子以7％的接種量放在二級搖瓶培養基中，于27℃、150rpm/min，培養3天，獲得二級靈芝菌絲體種子；

優選的，步驟(2)所述PDA培養基的原料組成為：土豆200g，磷酸二氫鈉4g，硫酸鎂1g，水1000g，葡萄糖20g，瓊脂18g。

優選的，步驟(3)所述一級搖瓶培養基的原料組成為：葡萄糖4g，酵母粉1g，磷酸二氫鈉0.6g，硫酸鎂0.2g，水200g。