[發(fā)明專利]一種提高根瘤菌USDA110競爭結(jié)瘤能力的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910730698.5 | 申請日： | 2019-08-08 |
| 公開（公告）號： | CN110452864B | 公開（公告）日： | 2021-01-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李友國;胡倡;杜倩 | 申請（專利權(quán)）人： | 華創(chuàng)佳農(nóng)生物科技（武漢）有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/74;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246 | 代理人： | 馬超前 |
| 地址： | 430075 湖北省武漢市東湖高新技術(shù)*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 提高 根瘤菌 usda110 競爭 能力 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種大豆根瘤菌USDA110突變體，其特征在于，通過將pK19mob質(zhì)粒插入根瘤菌USDA110的dgoK1基因序列中，得到根瘤菌USDA110的突變體。
2.權(quán)利要求1所述大豆根瘤菌USDA110突變體的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)根據(jù)dgoK1基因序列，設(shè)計上下游引物，PCR擴增獲得目的片段；
2)將目的片段與載體pMD19-T連接，測序；
3)將測序正確的菌抽質(zhì)粒進行酶切回收，連接到pK19mob上；
4)將插入失活質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到E.coliDH5α中，抽質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化到E.coli S17-1，通過兩親本接合轉(zhuǎn)移導入野生型菌USDA110中。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的上下游引物具體為：
F:CGGGATCC CCGCCTTGAAGCTTGCAA；
R:GGAATTCCAGGTCCTGGCCGAACG。
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