[發(fā)明專利]一種具有抗消化系統(tǒng)癌癥作用的霍山石斛多糖

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910729040.2
• 申請日: 2019-08-08
• 公開（公告）號: CN110452312B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅建平;葛基春;劉冰;尚貞子;張軍;王成;盧潤樟
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥工業(yè)大學(xué);霍山縣天下澤雨生物科技發(fā)展有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12P19/14;C12P19/04;A61K31/715;A61P35/00
• 代理公司: 合肥金安專利事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 34114
• 代理人: 金惠貞

1.一種具有抗消化系統(tǒng)癌癥作用的霍山石斛多糖，其特征在于：

所述霍山石斛多糖為組成均一的乙酰化葡甘聚糖，由吡喃型葡萄糖Glcp和吡喃型甘露糖Manp按摩爾比1 : 3的比例組成，其可重復(fù)一級結(jié)構(gòu)單元含有→4)-β-D-Glcp-(1→、→4)-β-D-Manp-(1→和→4)-3-O-acetyl-β-D-Manp-(1→三種糖殘基，所述三種糖殘基的連接方式如下所示：

其相對分子質(zhì)量為2.59×10⁵Da，乙酰基含量為2.78 %，所述霍山石斛多糖為首次從霍山石斛莖中分離獲得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗消化系統(tǒng)癌癥作用的霍山石斛多糖的制備方法，其特征在于操作步驟如下：

（1）將新鮮的霍山石斛莖于60 ℃下烘干，粉碎，80目過篩；按料液比1 g: 10 mL加入95%乙醇，在25 ℃、50 rpm轉(zhuǎn)速下攪拌處理24 h，過濾，傾去乙醇，濾渣自然風(fēng)干，得脫色脫脂的霍山石斛莖粉末；

（2）將脫色脫脂的霍山石斛莖粉末按料液比1 g: 40 mL與蒸餾水混合均勻，用0.1mol/L 鹽酸溶液調(diào)pH至5.0，按霍山石斛莖粉末質(zhì)量分?jǐn)?shù)1~1.5%的量加入果膠酶，在50 ℃、50 rpm轉(zhuǎn)速下攪拌酶解2～3 h，得霍山石斛果膠酶預(yù)處理物；

（3）向霍山石斛果膠酶預(yù)處理物中加入濃度0.1 mol/L氫氧化鈉溶液，調(diào)整pH值至6.2，再加入濃度0.2 mol/L的氯化鈣溶液至氯化鈣終濃度為25～50 ppm，按霍山石斛莖粉末質(zhì)量分?jǐn)?shù)3~5 %的量加入耐高溫淀粉酶，在90 ℃、50 rpm轉(zhuǎn)速下攪拌提取2～3 h，抽濾過濾，收集濾液，濾渣再按料液比1 g: 40 mL加入蒸餾水，在90 ℃、50 rpm轉(zhuǎn)速下攪拌重復(fù)提取2～3 h，抽濾過濾，收集濾液，合并兩次濾液，得霍山石斛水提物；

（4）將霍山石斛水提物于70.0 ℃、0.09～0.10 MPa真空度下減壓濃縮至原體積的1/3～1/4，于4 ℃、8000 rpm下離心20 min，收集上清液，加入適量95 %的乙醇，使乙醇的終濃度為80 %，4 ℃下沉淀12～24 h，于4 ℃、8000 rpm下離心20 min，收集沉淀，得霍山石斛醇沉物；

（5）取霍山石斛醇沉物，用適量去離子水溶解至多糖濃度為1 mg/mL，按30～50 g/L的添加量加入732型陽離子交換樹脂，50 rpm轉(zhuǎn)速下攪拌處理2～3 h，過濾，收集濾液，得霍山石斛多糖提取液；

（6）取霍山石斛多糖提取液，上陰離子交換樹脂DEAE cellulose DE-52柱，以去離子水按2 mL/min流速進(jìn)行洗脫，通過苯酚-硫酸比色法檢測洗脫液中多糖含量，收集含多糖洗脫液，得霍山石斛多糖精提液；

（7）取霍山石斛多糖精提液，上Sephadex G-50柱脫鹽提純，以去離子水按0.5 mL/min流速進(jìn)行洗脫，通過苯酚-硫酸比色法檢測洗脫液中多糖含量，收集含多糖洗脫液，經(jīng)真空冷凍干燥，得霍山石斛莖多糖。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述果膠酶的酶活為40000 U/g。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述耐高溫淀粉酶的酶活為40000 U/g。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗消化系統(tǒng)癌癥作用的霍山石斛多糖的用途，其特征在于：所述霍山石斛多糖在制備抗胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌的藥物中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種具有抗消化系統(tǒng)癌癥作用的霍山石斛多糖的用途，其特征在于，所述藥物制劑形式是任何供藥用的口服劑型，所述的藥物制劑形式包括片劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑。