[發明專利]含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201910727743.1
• 申請日: 2019-07-26
• 公開（公告）號: CN112353814A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 馬亞東;黃宗堂;曹娜
• 申請（專利權）人: 豐澤康生物醫藥（深圳）有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/06;A61K47/36;A61P17/00;C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑，其特征在于，在每100ml軟膏劑中含有以下物質組分：

間充質干細胞裂解物4～10×10⁸個細胞的裂解成分；間充質干細胞凍干粉10～20mg；穩定劑5～10g；電解質注射液50～100ml；保濕劑5～8ml；透皮劑5～10ml；蜂膠50～100mg。

2.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑，其特征在于，所述的穩定劑為透明質酸鈉、海藻酸鈉、殼聚糖、羥乙基淀粉中的一種或多種混合。

3.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑，其特征在于，所述的保濕劑為丙二醇或甘油的一種或多種混合。

4.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑，其特征在于，所述的電解質注射液為復方電解質葡萄糖MG3注射液。

5.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑，其特征在于，所述的透皮劑為薄荷腦。

6.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)人間充質干細胞培養后進行饑餓培養；收取細胞培養上清，濾膜過濾后的上清液中加入水溶性殼聚糖，混合均勻，獲得間充質干細胞裂解物，放于4℃冰箱中保存待用；

(2)間充質干細胞凍干粉的制備方法為，間充質干細胞上清液依次經0.45μm、0.22μm濾膜過濾，濃縮，凍干；

(3)將穩定劑、保濕劑、透皮劑溶于電解質溶液中，配制成均一的溶液；

(4)按比例，間充質干細胞裂解物、間充質干細胞凍干粉和步驟(3)的溶液混合均勻，放到-80℃冰箱中凍存。

7.根據權利要求6所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑的制備方法，其特征在于，步驟(1)具體包括以下步驟：

(a)人間充質干細胞培養：從細胞庫中選取P2～P6的人間充質干細胞，復蘇后分為三批次接種，三批次的接種密度分別為最大融合度的50％～60％、30％～40％、20％～30％；

接種培養細胞的完全培養基為無酚紅DMEM/DF12，并加入體積比濃度為10％胎牛血清；

細胞接種完成，放于培養箱培養，培養條件為，溫度37℃，二氧化碳體積比濃度5％；

(b)第一批的細胞培養的融合度達到70％～80％時，用生理鹽水清洗細胞2次，然后用復方電解質注射液進行饑餓培養；培養18～24小時后，第一批的細胞融合度達90％～95％時，收取細胞培養上清，在3000～4000g的條件下離心6～10min除去沉淀，取離心后上清；

(c)第二批的細胞培養的融合度達到70％～80％時，用生理鹽水清洗細胞2次，用步驟(b)第一批的細胞培養獲得的上清進行饑餓培養；培養18～24小時后，第二批的細胞融合度達90％～95％時，收取細胞培養上清，在3000～4000g的條件下離心6～10min除去沉淀，取離心后上清；

(d)第三批的細胞培養的融合度達到70％～80％時，用生理鹽水清洗細胞2次，用步驟(c)第二批的細胞培養獲得的上清進行饑餓培養；培養18～24小時后，第二批的細胞融合度達90％～95％時，收取細胞培養上清，在3000～4000g的條件下離心6～10min除去沉淀，取離心后上清；

(e)步驟(d)所述的上清用0.22um濾膜過濾，并向過濾后的上清中加入水溶性殼聚糖，混合均勻；所述的水溶性殼聚糖中殼聚糖質量濃度為0.05％～0.08％。

8.根據權利要求1所述的含有間充質干細胞裂解物的嬰兒去濕疹軟膏劑的應用，其特征在于，用于治療嬰兒去濕疹。