[發明專利]檢測水果中葉菌唑殘留量的方法

在審

• 申請號: 201910709841.2
• 申請日: 2019-08-02
• 公開（公告）號: CN111175433A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李如美;高宗軍;李瑞娟;戴爭
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: G01N30/96
• 分類號: G01N30/96;G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 韓后良

檢測水果中葉菌唑殘留量的方法。本方法包括三步，第一步提取，第二步凈化，第三步測定和結果計算。本發明用于檢測蘋果、小麥中葉菌唑殘留量。

技術領域

本發明涉及一種檢測水果中葉菌唑殘留量的方法。

背景技術

葉菌唑是一種三唑類殺菌劑，其通用名metconazole，化學名 (1RS,5RS,1RS,5SR)-5-(4-氯苯基)-2,2-二甲基-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基甲基)-環戊醇。殺蟲機理是通過抑制麥角淄醇生物合成中C-14脫甲基化酶活性達到殺菌的目的。該藥主要用于防治小麥殼針孢、穗鐮刀菌、葉銹病、條銹病、白粉病、穎枯病；大麥矮形銹病、白粉病、喙孢屬；黑麥喙孢屬、葉銹病；燕麥冠銹病，小黑麥(小麥與黑麥雜交) 葉銹病、殼針孢。對殼針孢屬和銹病活性優異。兼具優良的保護及治療作用。對小麥的穎枯病特別有效，預防、治療效果俱佳。廣泛應用于小麥、大麥、燕麥、黑麥、小黑麥等作物。葉菌唑是新的、廣譜內吸性殺菌劑，既可莖葉處理又可作種子處理，可在植物體內吸收傳導起到滅菌效果。同時，該藥還可與戊唑醇、克菌丹等多種殺菌劑混用，防治某些病害，具有對非靶標生物低毒，用量低而殺菌活性高，環境前景佳等特點，對玉米、油菜籽、大豆、草坪、果樹等的葉、穗發生的諸多病害有很高的防除效果。因此該品種在國外得到廣泛應用。

葉菌唑有肝癌毒性、急性毒性、發育毒性、及神經毒性，由于使用廣泛，葉菌唑通過環境進入人體的幾率大，對人的身體健康影響較大。葉菌唑的檢測方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質譜法、氣液色譜法-串聯質譜法、液相色譜-串聯質譜法等，但尚未見葉菌唑在水果中殘留行為方面的研究報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種簡便、快速、準確的在蘋果和葡萄中檢測葉菌唑殘留量的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法。

上述的目的通過以下的技術方案實現：

一種檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，本方法包括三步，第一步提取，第二步凈化，第三步測定和結果計算。

所述的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，所述的第一步提取是取待檢測的水果樣品，切成小段或小塊，置于離心管中，加入乙腈勻漿，加入NaCl，再次勻漿，離心。

所述的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，所述的乙腈的加入比例為：每1000mg水果樣品加入1ml的乙腈；所述的NaCl的加入比例為：每1克水果樣品加入500mg的NaCl；

當蘋果或葡萄樣品為脫水果或葡萄時，切成小段或小塊后，加入適量水充分浸潤，時間為5～30min，然后再加入乙腈進行勻漿；

所述的離心的參數為5000r/min離心5min。

所述的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，所述的第二步凈化是第一步離心后，取上層乙腈相，置于裝有基質分散固相萃取劑的離心管中，混勻，離心，取上清液，選取旋轉蒸發儀進行50℃旋蒸，流動相定容，過0.22μm有機系濾膜，得樣品液。

所述的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，所述的基質分散固相萃取劑由乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、十八烷基硅烷鍵合相(C18)和石墨化炭黑(GCB)組成，PSA、C18和GCB三者的用量比例為100mg： 50mg：10mg；每1ml乙腈相對應的PSA、C18和GCB三者的用量分別為100mg、50mg、10mg；

所述的離心的參數為：5000r/min離心5min。

所述的檢測水果中葉菌唑殘留量的方法，所述的第三步測定和結果計算是進行定性和定量測定或定性測定或定量測定；

所述的定性測定是檢測樣品中目標化合物的母離子和子離子對，若其離子色譜峰保留時間與標準工作液一致；樣品中目標化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當的空白基質標準液的離子相對豐度偏差不超過30％時，則判斷該樣品中存在葉菌唑；若上述兩個條件不能同時滿足，則判斷樣品中不含葉菌唑；