[發明專利]用于檢測CYP2C9基因和VKORC1基因多態性的探針、引物、試劑盒

在審

• 申請號: 201910691202.8
• 申請日: 2019-07-29
• 公開（公告）號: CN112301121A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 毛丹丹;張小燕;張奕;傅詠南
• 申請（專利權）人: 上海利康精準醫療技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.用于檢測CYP2C9基因和VKORC1基因多態性的探針，該探針的序列如SEQ ID NO.:1、SEQ ID NO.:4、或SEQ ID NO.:7所示；或者在SEQ ID NO.:1、SEQ ID NO.:4、SEQ ID NO.:7的序列兩端加以基團修飾。

2.根據權利要求1所述的探針，其特征在于其中SEQ ID NO.:1的修飾基團為：5′的修飾基團為熒光基團HEX；3′的修飾基團為淬滅基團BHQ1；其中SEQ ID NO.:4的修飾基團為：5′的修飾基團為熒光基團FAM；3′的修飾基團為淬滅基團BHQ1；其中SEQ ID NO.:7的修飾基團為：5′的修飾基團為熒光基團CY5；3′的修飾基團為淬滅基團BHQ2。

3.根據權利要求1所述的探針，其特征在于所述的探針包括環序列和莖序列，其中SEQID NO.:1的環序列為第6～26bp；其中SEQ ID NO.:4的環序列為第6-18bp；其中SEQ IDNO.:7的環序列為第6-18bp。

4.用于檢測CYP2C9基因和VKORC1基因多態性的引物，其特征在于該引物的序列如SEQID NO.:2和SEQ ID NO.:3；SEQ ID NO.:5和SEQ ID NO.:6；SEQ ID NO.:8和SEQ ID NO.:9所示。

5.用于檢測CYP2C9基因和VKORC1基因多態性的試劑盒，其特征在于該試劑盒包含權利要求1-3任一項所述的探針和/或權利要求4所述的引物。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于該試劑盒還包含還有Taq酶、dNTP、和/或Mg²⁺，以及使用說明書。

7.一種用于檢測CYP2C9基因和VKORC1基因多態性的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

(1)采集樣本，抽提DNA；

(2)應用權利要求1-3任一項所述的探針和權利要求4所述的引物進行熒光定量PCR反應；

(3)應用PCR儀配套軟件分析結果，根據擴增曲線，規定合適基線和閾值，基于形成的雜交峰所顯示的Tm值差異展現不同的基因型。