[發明專利]一種血液中氟康唑藥物濃度監測試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 201910672195.7
• 申請日: 2019-07-24
• 公開（公告）號: CN110470775A
• 公開（公告）日: 2019-11-19
• 發明（設計）人: 石功名;何伶秀
• 申請（專利權）人: 蘇州艾迪邁醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/16;G01N30/34;G01N30/86
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1.一種血液中氟康唑藥物濃度監測試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括校準品試劑、質控品試劑、處理液、萃取液、清洗液、洗脫液。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述校準品試劑為含氟康唑凍干粉、穩定劑與塑型劑的動物血清，所述氟康唑凍干粉在動物血清中的濃度范圍為0.5～15mg/L，濃度梯度為0.5～15mg/L；所述穩定劑的濃度為10～30g/L，所述塑型劑的濃度為10～30g/L；

所述質控品試劑為含氟康唑凍干粉、穩定劑與塑型劑的動物血清，所述氟康唑凍干粉在動物血清中的濃度范圍為0.5～15mg/L，所述穩定劑的濃度為10～30g/L，所述塑型劑的濃度為10～30g/L；

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述穩定劑的濃度為15～25g/L，所述塑型劑的濃度為15～25g/L；

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述樣本處理液為醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量為5％～15％，所述乙腈的含量為5％～15％。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述萃取液包括萃取液H1和萃取液H2；

所述萃取液H1為醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量為3％～10％，所述乙腈的含量為2％～8％。

所述萃取液H2為醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.05‰～0.15‰，所述甲醇的含量為30％～50％，所述乙腈的含量為40％～70％。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的清洗液為甲醇或乙腈或兩種混合物的水溶液。

7.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的洗脫液包括洗脫液A、洗脫液B和洗脫液C；

所述洗脫液A為醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.05‰～0.15‰，所述甲醇的含量為0％～15％，所述乙腈的含量為70％～90％；

所述洗脫液B醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量為0％～10％，所述乙腈的含量為5％～15％；所述洗脫液B的pH為3～5；

所述洗脫液C醋酸鹽緩沖溶液、乙腈和甲醇中的一種或兩種以上的混合物的水溶液，所述醋酸鹽緩沖溶液中醋酸銨的含量為0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量為0％～10％，所述乙腈的含量為5％～15％；所述洗脫液B的pH為6～8。

8.根據權利要求4～7任意一項所述的試劑盒，其特征在于：所述的醋酸緩沖液包括醋酸、醋酸銨、氨水的一種或兩種及以上的混合物。

9.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述的穩定劑為牛血清白蛋白(BSA)；所述的塑型劑甘露醇和蔗糖一種或兩種的混合物，所述甘露醇與蔗糖的混合物的比例為1：2～5。

10.一種權利要求1所述的試劑盒的檢測方法，包括如下步驟：血液樣品經離心后取上清液進樣，通過在線固相萃取柱進行在線凈化、富集、解吸及柱前后補償聯用，再通過閥切換方式將血液樣品中目標分析物送入分析柱中進行分離，最后通過紫外檢測器，或二極管陣列檢測器，或質譜檢測器等分析檢測，采用標準曲線法進行計算，最終獲得血液樣品中藥物濃度值；

計算公式如下：擬合線性回歸方程：y＝ax+b，其中a為斜率，b為截距，y為實測峰面積，x為標示濃度，樣本結果計算：將樣本的氟康唑峰面積代入標準曲線方程，計算樣本中的氟康唑濃度；

具體步驟如下：

(1)取待檢測樣品1～4mL，在離心速度為3000～5000rpm下離心10min，取上清液得血清或血漿；

(2)取上述血清或血漿，移取1.0ml加入樣品瓶中，放入自動進樣器中進樣100ul進行液相色譜定量檢測；

(3)根據上述公式計算出樣本中的藥物濃度。