[發明專利]一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠

在審

• 申請號: 201910660987.2
• 申請日: 2019-07-22
• 公開（公告）號: CN110237302A
• 公開（公告）日: 2019-09-17
• 發明（設計）人: 史冬泉;閆文強;蔣青;徐興全;戴進
• 申請（專利權）人: 南京鼓樓醫院
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/36;A61L27/52;A61L27/54;A61L27/58
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司 32252
• 代理人: 蔣廈

本發明涉及一種關節軟骨修復材料的制備方法?自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠，包括(1)透明質酸水凝膠的制備；(2)自體富血小板血漿的提取。本發明通過原位募集自體干細胞進行修復，從而避免了體外培養的細胞低存活率及低分化潛能的缺點。本發明將透明質酸水凝膠及富血小板血漿注射入缺損處，無需二期手術，從而實現軟骨缺損修復。因而極大的提高其在臨床的可推廣性。

技術領域

本發明涉及醫療材料領域，具體涉及一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠。

背景技術

骨性關節炎是一種關節退變的疾病，隨著國內人口老齡化的不斷進展，因此骨性關節炎成為影響老年人生活質量的主要原因。由于目前臨床上尚無有效的緩解骨性關節炎的方法，最終只能通過關節置換來緩解其導致的關節疼痛。但是大量的關節置換給家庭和社會帶來了嚴重的經濟負擔，因而骨性關節炎是亟需解決的重大問題。

軟骨缺損是骨性關節炎的主要表現，目前臨床上常用的治療軟骨缺損的方法主要包括微骨折，自體或異體骨軟骨移植，軟骨細胞移植，而這些方法均無法再生出天然的透明軟骨，所修復的組織在成分及性能上明顯低于天然軟骨，因而只能在一定程度上緩解軟骨退變。近年來，利用組織工程技術修復關節軟骨缺損得到了很大的發展，例如利用軟骨細胞體外培養形成軟骨組織，隨后植入軟骨缺損處，或將軟骨細胞與三維支架結合植入軟骨缺損處進行修復。無論何種組織工程修復技術都離不開三要素，即支架、生長因子、種子細胞。其修復過程為支架可提供干細胞進行粘附，生長及分化的空間三維結構，生長因子可促進干細胞成軟骨分化，并分泌軟骨基質，沉積于三維支架中，隨后支架逐漸降解，從而再生出天然軟骨。下面將從這三方面闡明本發明中使用的方法較其他現有方法的優勢。

首先，目前常用的組織工程支架為PLA，PGA或膠原支架，這種支架產生的軟骨成分主要是一型膠原，而天然透明軟骨的主要成分為二型膠原，因為無法再生出天然軟骨。本發明使用的為可注射透明質酸水凝膠支架，該支架具有的突出優勢主要包括，1、局部注射入軟骨缺損處，隨后通過紫外點光源照射后即可固化，因此不受軟骨缺損形狀的限制；2.透明質酸為天然軟骨中的固有成分，因而透明質酸水凝膠具有良好的生物相容性，并且具有良好的可降解性能。3、透明質酸水凝膠為含水量較高的支架，可模仿正常軟骨的三維空間結構，從而為細胞的生長分化提供良好的微環境。

生長因子可以促進干細胞向軟骨方向分化，從而產生軟骨相關基質。由于目前常用的生長因子為體外合成或異體生長因子，而這些生長因子具有一定的免疫原性，并且價格昂貴，從而限制其在體內的應用。本發明使用的是通過自體血液離心后獲取的富血小板血漿，富血小板血漿中富含有多種生長因子，包括TGF-beta、VEGF、PDGF、IGF等，這些生長因子可促進干細胞向軟骨方向分化。并且這些生長因子可持續從血小板中釋放，從而在軟骨缺損部位持續刺激軟骨生成。

軟骨的修復離不開細胞的參與，軟骨缺損后參與修復的細胞主要有骨髓來源的間充質干細胞，滑膜來源的干細胞或脂肪來源的干細胞。目前組織工程技術通過體外培養細胞，隨后植入缺損部位，但是植入后的細胞存活率較低，尤其是離體后導致其分化潛能降低，從而導致修復能力有限。而本發明通過將透明質酸水凝膠及自體富血小板血漿注入軟骨缺損部位，其中富血小板血漿釋放的生長因子可募集自體干細胞遷移至缺損部位，隨后在水凝膠支架中生長，在富血小板血漿釋放的生長因子作用下向軟骨細胞分化，從而修復缺損軟骨。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中存在的問題，提供一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠，通過原位募集自體干細胞進行修復，從而避免了體外培養的細胞低存活率及低分化潛能的缺點。

為實現上述目的，本發明提供的技術方案是：

一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠，包括以下步驟：

一、透明質酸水凝膠的制備：