[發明專利]一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠在審
| 申請號: | 201910660987.2 | 申請日: | 2019-07-22 |
| 公開(公告)號: | CN110237302A | 公開(公告)日: | 2019-09-17 |
| 發明(設計)人: | 史冬泉;閆文強;蔣青;徐興全;戴進 | 申請(專利權)人: | 南京鼓樓醫院 |
| 主分類號: | A61L27/20 | 分類號: | A61L27/20;A61L27/36;A61L27/52;A61L27/54;A61L27/58 |
| 代理公司: | 南京鐘山專利代理有限公司 32252 | 代理人: | 蔣廈 |
| 地址: | 210008 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 富血小板血漿 透明質 凝膠 酸水 自體 制備 關節軟骨修復 軟骨缺損修復 自體干細胞 分化潛能 體外培養 存活率 推廣性 缺損 注射 細胞 修復 | ||
1.一種關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠,其特征在于:包括以下步驟:
一、透明質酸水凝膠的制備:
1)取適量透明質酸鈉溶解在蒸餾水中,低溫條件4-20度下,攪拌12h;
2)向所得溶液中加入適量甲基丙酸烯酐,在pH為8-9,溫度為4度的條件下反應24h;
3)將所得產物在丙酮中沉淀,用乙醇洗凈,溶解在去離子水中,去離子水透析48h后,得到修飾后的透明質酸鈉;
4)將修飾后的透明質酸鈉按2%濃度溶解在蒸餾水中,按照0.1%濃度加入光引發劑,將液態水凝膠注入軟骨缺損部位,紫外點光源照射下原位成膠,即可得到固化的透明質酸水凝膠;
二、自體富血小板血漿的提?。?/p>
1)將適量枸櫞酸鈉抗凝劑加入提取離心管中;
2)在全血中加入預先混有枸櫞酸鈉抗凝劑的離心管中,充分混勻;
3)進行第一次離心,離心速度為2400r/min,離心時間為10min;
4)第一次離心后,血液分為三層,包括底層的血細胞、中層的白膜層、表層的血清,將底層的血細胞抽出;
5)放入離心機中進行第二次離心,第二次離心后,同樣分為三層,使用注射器將表層的血清層抽出,即可得到濃縮的富血小板血漿;
6)將提取的濃縮富血小板血漿注入關節腔內,即可得到自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠軟骨修復系統。
2.根據權利要求1所述的關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠,其特征在于:所述光引發劑采用Irgacure 2959。
3.根據權利要求1所述的關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠,其特征在于:步驟一中,每100ml蒸餾水中溶解2g透明質酸鈉,然后加入1.6ml的甲基丙酸烯酐。
4.根據權利要求1所述的關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠,其特征在于:步驟一、4)中,紫外光強度為15μW/cm2,照射時間為30s。
5.根據權利要求1所述的關節軟骨修復材料的制備方法-自體富血小板血漿結合透明質酸水凝膠,其特征在于:步驟二中,枸櫞酸鈉抗凝劑與全血的體積比為1:9。
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