[發(fā)明專利]一種煙酸通過GPR109A受體應用于治療奶牛乳腺炎的實驗方法

有效

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• 申請日: 2019-07-19
• 公開（公告）號: CN110376366B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設計）人: 柳巨雄;郭文晉;付守鵬;曹宇;闞興池
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N21/64;C12Q1/6876
• 代理公司: 北京棘龍知識產權代理有限公司 11740
• 代理人: 謝靜

本發(fā)明公開了一種煙酸通過GPR109A受體應用于治療奶牛乳腺炎的實驗方法，包括以下步驟：S1、乳腺炎奶牛的篩選：初步篩選出乳腺炎為陽性的奶牛，其體細胞數約為80?200萬/mL；S2、奶牛血清和乳清中促炎因子的檢測：分別在第0天和第7天收集正常奶牛、乳腺炎奶牛和飼喂煙酸的乳腺炎奶牛中的外周血，然后提取血液中的血清。本發(fā)明通過制定全新的奶牛乳腺炎治療策略，通過分離奶牛的血清和乳清檢測了煙酸治療后乳腺炎奶牛體內促炎介質的表達，利用分子生物學方法全面的評估了煙酸對奶牛乳腺炎的治療效果，煙酸能夠有效減少奶牛血清和乳清中促炎介質的表達，從而達到保護乳腺緩解炎癥的功效。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體為一種煙酸通過GPR109A受體應用于治療奶牛乳腺炎的實驗方法。

背景技術

奶牛乳腺炎是一種由多種病原微生物混合感染乳腺組織所引起的一種炎癥性疾病。在全世界范圍內，奶牛乳腺炎都是阻礙奶牛產業(yè)健康發(fā)展的嚴峻問題。在最近的幾十年間，奶牛乳腺炎問題并未得到很好的解決，仍然對全世界奶牛產業(yè)造成巨大經濟損失。每年全球因奶牛乳腺炎所造成的經濟損失高達350億美元。而引起奶牛乳腺炎的主要原因則是病原微生物入侵奶牛乳腺。而在奶牛臨床中抗生素的應用雖然可以殺滅病原微生物，但是對于一些耐藥菌株和感染后的炎癥反應并無太好的效果。細菌感染后，會在乳腺中產生大量內毒素，這些內毒素的主要成分就是脂多糖(LPS)。它能夠引起機體產生強烈的免疫原性反應。LPS也會引發(fā)乳腺上皮細胞或巨噬細胞的免疫反應，從而分泌大量的炎性因子，損傷乳腺上皮細胞，導致乳腺炎。目前針對乳腺炎的治療主要是抗生素配合抗炎藥物的聯(lián)合應用，因此抗乳腺炎藥物的研發(fā)具有重要意義，這是因為單純的抗生素應用無法很好的治愈奶牛乳腺炎，在奶牛乳腺炎的治療過程中需要配合使用抗炎藥物，以緩解奶牛乳腺中嚴重的炎癥反應。以往的抗炎藥物價格較高且有一定藥物殘留，在奶牛生產中藥物殘留會嚴重影響患病奶牛所產牛奶的收購，因此會嚴重影響奶牛場的經濟效益從而造成大量經濟損失。那么如何盡快恢復乳腺炎奶牛的正常生產成為治療奶牛乳腺炎的又一難點，而本發(fā)明中應用煙酸作為一種新型抗奶牛乳腺炎的藥物，具有無殘留和價格低廉的特點，在奶牛乳腺炎治愈后可以快速恢復乳腺炎奶牛的泌乳和生產。

GPR109A屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族，它能夠通過激活下游相關信號通路來抑制炎癥的發(fā)生和發(fā)展，從而達到抗炎的效果，許多研究表明GPR109A在體內參與抗炎、降脂和抗癌的功能。而煙酸作為GPR109A的配體，能夠通過激活GPR109A發(fā)揮抗炎功能，并在奶牛中予以應用。

煙酸屬于B族維生素。煙酸主要參與體內的脂質代謝，炎癥反應和糖代謝等。前人的研究表明煙酸能夠通過激活GPR109A抑制結腸炎的發(fā)展。也有人發(fā)現(xiàn)煙酸能抑制血管內皮細胞炎癥。有研究表明傳統(tǒng)抗炎藥的長期應用很容易產生胃腸道反應、腎毒性和肝毒性等其他副作用，由于傳統(tǒng)抗炎藥物的價格昂貴，因此大規(guī)模的抗炎藥應用也會造成大量經濟損失。而且甾體類抗炎藥物含有的激素成分會對奶牛的乳汁成分產生影響，從而影響牛奶的收購，進一步加大奶牛場的損失。而煙酸本身不會產生藥物殘留，且廉價易得。因此煙酸作為一種新型的抗乳腺炎藥物具有傳統(tǒng)藥物不具備的優(yōu)勢，但是目前煙酸對于乳腺炎的作用還不清楚，因此本發(fā)明擬應用煙酸治療和預防奶牛乳腺炎。

發(fā)明內容

(一)解決的技術問題

針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供了一種煙酸通過GPR109A受體應用于治療奶牛乳腺炎的實驗方法，在ELISA試驗中證實了煙酸能夠通過激活GPR109A，并且顯著抑制乳腺炎奶牛乳清和血清中IL-6、TNF-α和IL-1β的蛋白表達。

(二)技術方案

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：一種煙酸通過GPR109A受體應用于治療奶牛乳腺炎的實驗方法，包括以下步驟：

S1、乳腺炎奶牛的篩選：初步篩選出乳腺炎為陽性的奶牛，其體細胞數約為80-200萬/mL；