[發明專利]一種化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請號: 201910650968.1
• 申請日: 2019-07-18
• 公開（公告）號: CN110320300B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 郭中華;張立壯;陳潔忠;其木格;張志平;劉偉偉;胡宇
• 申請（專利權）人: 河南太龍藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36
• 代理公司: 北京坦路來專利代理有限公司 11652
• 代理人: 汪送來

1.一種化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法進行檢測的步驟，其中，所述高效液相色譜的條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱為固定相，以流動相所有組分的體積百分比為100％計，按下述程序進行梯度洗脫：

所述梯度洗脫程序中，在各時間段內，流動相中各組分的體積百分比勻速變化；

所述十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱為選自：色譜柱Welch Ultimate XB-C18、250×4.6mm、5μm，或色譜柱Kromasil 100-5C18、250×4.6mm、5μm，或色譜柱Thermo 120A、250×4.6mm、5μm；

檢測波長為242-247nm；

化肝煎供試品溶液的制備方法如下：取化肝煎煎液，蒸干，殘渣加乙醇，超聲處理，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液；

采用芍藥苷作為對照品。

2.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱為：色譜柱Welch Ultimate XB-C18、250×4.6mm、5μm。

3.根據權利要求1或2所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述色譜柱柱溫為25-40℃。

4.根據權利要求1或2所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，色譜柱柱溫為30-40℃。

5.根據權利要求1或2所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，色譜柱柱溫為40℃。

6.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述流動相的流速為0.8-1.2ml/min。

7.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述流動相的流速為1.0ml/min。

8.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，檢測波長為245nm。

9.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，進樣量為5-20μl。

10.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，進樣量為10μl。

11.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，色譜柱的理論塔板數不低于3000。

12.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，制備所述化肝煎的原料藥包括：青皮7.4重量份、陳皮7.4重量份、白芍7.4重量份、牡丹皮5.5重量份、炒梔子5.5重量份、澤瀉5.5重量份、浙貝母9.2重量份。

13.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述乙醇的濃度為70-95體積％。

14.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述乙醇的濃度為70體積％。

15.根據權利要求1所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，對照品溶液制備方法如下：稱取芍藥苷對照品，加乙醇制成40-50μg/ml的溶液，作為對照品溶液。

16.根據權利要求15所述的化肝煎的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于，對照品溶液制備方法如下：稱取芍藥苷對照品，加乙醇制成45μg/ml的溶液，作為對照品溶液。