[發明專利]一種人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201910643715.1
• 申請日: 2019-07-17
• 公開（公告）號: CN112239791A
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 鄭超;陳素華;吳祚達
• 申請（專利權）人: 新開源博暢（武漢）生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

本發明公開了一種人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒，其中，所述試劑盒包括三對擴增引物、多重PCR混合反應液，其中擴增引物用于擴增肥胖基因多態性位點，包括rs13199524位點、rs12198173位點和/或rs3093662位點中的至少兩個位點，每對引物分別對應一個SNP位點的上下游區域。本發明采用人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒采用多重PCR的擴增方法，同時擴增與HIV相關的三個重要SNP位點，且可以根據實際需要靈活選擇擴增的位點組合，可以起到一盒多用的作用，試劑盒中的引物特異性高，錯配率低，引物長度和T_m值設計合理，擴增產物便于檢測分離。一次擴增多條目的產物，不僅大大提高了擴增效率，降低了擴增成本。這種檢測試劑盒可以擴展延伸到其他的SNP位點檢測中，具有良好的推廣價值。

技術領域

本發明涉及一種人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒，屬于檢測試劑盒領域。

背景技術

自首例病例被發現至今，HIV感染已在全世界廣泛蔓延，成為一種嚴重危害人類生命健康和社會經濟發展的傳染性疾病。WHO估計全世界累計有超過6500萬人感染，死亡人數接近2500萬人。雖然艾滋病不是一種遺傳性疾病，但人體對HIV-1的易感性，除病毒本身和個體的行為因素外，宿主的遺傳因素也起了重要作用，一些個體的不感染和長期不進展現象完全是宿主本身的遺傳背景造成的。發現艾滋病易感性和疾病進程相關的基因是揭示HIV發病機理、研發新的治療藥物和疫苗的一個重要突破口。

1996年研究者發現了首個艾滋病相關基因CCR5△32，CCR5△32純合子攜帶者對病毒幾乎擁有完全的抵御力。該發現不但首次證明了CCR5是感染細胞的輔助受體，而且因此掀起了尋找艾滋病相關基因的高潮，發現了許多與艾滋病易感性、疾病進程快慢、治療效果等因素有關的基因。最近五年，SNP基因分型技術取得了長足的進展，使進行大樣本、大量位點的研究成為可能。

ANRS01以ANRS PRIMO隊列的606名有血清轉換時間的歐洲白人為樣本，以感染初期病毒載量為觀察指標，最終發現rs2396029、rs13199524、rs12198173和rs309366四個位點有顯著差異。此外，在候選基因研究方面，美國研究者報道部分與疾病進程有關的經典位點對HAART療效有相關關系。而亞洲人群遺傳背景與歐美、非洲裔人群均有較大區別，因此對于中國人群相關的SNP位點與疾病進程的關系進行研究，對于臨床研究和診斷具有重要的意義。

發明內容

針對現有技術存在的上述問題，本發明的目的是獲得一種人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒。

為實現上述發明目的，本發明采用的人類免疫缺陷病毒檢測試劑盒的技術方案如下：

所述試劑盒包括三對擴增引物、多重PCR混合反應液，其中擴增引物用于擴增肥胖基因多態性位點，包括rs13199524位點、rs12198173位點和/或rs3093662位點中的至少兩個位點，每對引物分別對應一個SNP位點的上下游區域。

優選的，所述rs13199524位點的擴增引物序列如序列表SEQ ID NO：1～2所示。

優選的，所述rs12198173位點的擴增引物序列如序列表SEQ ID NO：3～4所示。

優選的，所述rs3093662位點的擴增引物序列如序列表SEQ ID NO：5～6所示。

優選的，所述多重PCR混合反應液包括DNA聚合酶、Mg²⁺和dNTPs。更進一步優選的，多重PCR混合反應液中還包括PCR穩定劑和增強劑。

優選的，所述擴增體系中，每個SNP位點的擴增引物和模板的加入量相同。

本發明中的檢測試劑盒一般采用處理過的DNA樣品作為擴增模板，樣品一般來源于人全血或組織，處理樣品可以減少血液中的免疫球蛋白G、血紅蛋白和乳鐵蛋白對PCR反應體系的干擾。