[發明專利]一種液基薄層細胞制片的方法在審
| 申請號: | 201910631022.0 | 申請日: | 2019-07-12 |
| 公開(公告)號: | CN110398401A | 公開(公告)日: | 2019-11-01 |
| 發明(設計)人: | 趙路;陳水煜;湯哲文;賈磊;鐘娟 | 申請(專利權)人: | 上海晶鑄生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N1/28 | 分類號: | G01N1/28 |
| 代理公司: | 上海段和段律師事務所 31334 | 代理人: | 陳少凌;郭國中 |
| 地址: | 201100 上海市閔行區閔*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 樣本 巴氏染色 細胞制片 樣本處理 沉降倉 基薄層 板條 樣杯 制片 種液 預處理 紅細胞去除 白細胞 靜置沉降 緩沖液 玻片 磁珠 對轉 放入 封片 加樣 上機 去除 沖洗 優化 | ||
1.一種液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:
S1、將預處理后的樣本逐個放入板條,并將板條逐個上機;
S2、轉移樣本至轉樣杯;對轉樣杯中的樣本進行樣本處理;
S3、處理后的樣本加樣至沉降倉,靜置沉降,吸去上清;
S4、巴氏染色;
S5、將巴氏染色后的玻片轉移出沉降倉,液體封片。
2.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S2中,所述樣本處理包括37℃孵育,反應體系切換,沖洗紅細胞去除,換PBS緩沖液,加入磁珠去除白細胞干擾。
3.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述37℃孵育的時間為8-12min。
4.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述反應體系切換為生理鹽水體系。
5.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述沖洗紅細胞去除采用的沖洗液為生理鹽水;沖洗時間為3-5min。
6.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S1中,所述預處理包括樣本整理、擺放、掃碼。
7.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S4中,所述巴氏染色包括如下步驟:
A1、步驟S3中樣本靜置沉降,吸去上清后置入無水乙醇或異丙醇8-12秒;
A2、置入PH7.8 tris緩沖液3-8秒;
A3、置入蘇木素染液2-6分鐘;
A4、置入PH7.8 tris緩沖液0.8-1.2分鐘;
A5、置入無水乙醇或異丙醇,重復2遍;
A6、置入EA-OG混合染液2-6分鐘;
A7、置入無水乙醇或異丙醇8-12秒,重復2遍;
A8、置于二甲苯8-12秒,重復2遍;
A9、濕封片。
8.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S5中,巴氏染色后的玻片轉移出沉降倉后,自動清潔臂清洗沉降倉。
9.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S5中,所述的液體封片采用的封片試劑為紫外光固化膠。
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