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[發明專利]一種液基薄層細胞制片的方法在審

專利信息
申請號: 201910631022.0 申請日: 2019-07-12
公開(公告)號: CN110398401A 公開(公告)日: 2019-11-01
發明(設計)人: 趙路;陳水煜;湯哲文;賈磊;鐘娟 申請(專利權)人: 上海晶鑄生物科技有限公司
主分類號: G01N1/28 分類號: G01N1/28
代理公司: 上海段和段律師事務所 31334 代理人: 陳少凌;郭國中
地址: 201100 上海市閔行區閔*** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 樣本 巴氏染色 細胞制片 樣本處理 沉降倉 基薄層 板條 樣杯 制片 種液 預處理 紅細胞去除 白細胞 靜置沉降 緩沖液 玻片 磁珠 對轉 放入 封片 加樣 上機 去除 沖洗 優化
【權利要求書】:

1.一種液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:

S1、將預處理后的樣本逐個放入板條,并將板條逐個上機;

S2、轉移樣本至轉樣杯;對轉樣杯中的樣本進行樣本處理;

S3、處理后的樣本加樣至沉降倉,靜置沉降,吸去上清;

S4、巴氏染色;

S5、將巴氏染色后的玻片轉移出沉降倉,液體封片。

2.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S2中,所述樣本處理包括37℃孵育,反應體系切換,沖洗紅細胞去除,換PBS緩沖液,加入磁珠去除白細胞干擾。

3.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述37℃孵育的時間為8-12min。

4.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述反應體系切換為生理鹽水體系。

5.如權利要求2所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,所述沖洗紅細胞去除采用的沖洗液為生理鹽水;沖洗時間為3-5min。

6.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S1中,所述預處理包括樣本整理、擺放、掃碼。

7.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S4中,所述巴氏染色包括如下步驟:

A1、步驟S3中樣本靜置沉降,吸去上清后置入無水乙醇或異丙醇8-12秒;

A2、置入PH7.8 tris緩沖液3-8秒;

A3、置入蘇木素染液2-6分鐘;

A4、置入PH7.8 tris緩沖液0.8-1.2分鐘;

A5、置入無水乙醇或異丙醇,重復2遍;

A6、置入EA-OG混合染液2-6分鐘;

A7、置入無水乙醇或異丙醇8-12秒,重復2遍;

A8、置于二甲苯8-12秒,重復2遍;

A9、濕封片。

8.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S5中,巴氏染色后的玻片轉移出沉降倉后,自動清潔臂清洗沉降倉。

9.如權利要求1所述的液基薄層細胞制片的方法,其特征在于,步驟S5中,所述的液體封片采用的封片試劑為紫外光固化膠。

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