[發明專利]一種HPV抗體快速檢測試紙條及其制備方法和使用方法

有效

• 申請號: 201910616639.5
• 申請日: 2019-07-09
• 公開（公告）號: CN110297087B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發明（設計）人: 陳彬
• 申請（專利權）人: 津熙醫學科技（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種HPV抗體快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于：

所述試紙條包括沿層析方向依次設置的樣品墊(2)、結合墊(3)、分析膜(4)、吸水墊(5)和手柄(6)，所述樣品墊(2)的表面附著有檸檬酸-檸檬酸鈉，所述結合墊(3)上設置有抗人IgG抗體-納米金顆粒，所述分析膜(4)上設置有檢測帶(7)和質控帶(8)，所述檢測帶(7)的主要成分為HPV L1，所述質控帶(8)的主要成分為與抗人IgG抗體結合的二抗；

所述制備方法，包括以下步驟：

①、膠液的配制

將羧甲基纖維素鈉和蒸餾水按1:99的重量比混合均勻，得到膠液；

②、檸檬酸-檸檬酸鈉膏體的配制

將檸檬酸、檸檬酸鈉和蒸餾水按2:8:90的重量比混合均勻，得到檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；

③、樣品墊(2)的浸潤干燥處理

將樣品墊(2)浸入步驟②制得的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，潤濕后取出瀝干檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；

④、試紙條的粘接成型

取出底板(1)，在底板(1)的一側面涂覆上步驟①制得的膠液，先將分析膜(4)鋪設于底板(1)的中部，再依次將結合墊(3)鋪設于分析膜(4)在遠離手柄(6)的一端、將吸水墊(5)鋪設于分析膜(4)在靠近手柄(6)的一端、將經浸潤干燥后的樣品墊(2)鋪設于結合墊(3)遠離分析膜(4)的一端，晾干蒸餾水后根據試紙卡的規格切割成一定的長度和寬度，即得所述的試紙條；

所述樣品墊(2)的制備方法包括以下步驟：

a、將硝酸纖維素、高分子吸水樹脂分別使用乙醇溶解，對應的形成NC膠液和樹脂膠液；

b、用PVC片作為基層，采用靜電紡絲法自下而上依次對樹脂膠液和NC膠液進行紡絲，乙醇揮發完全后得到“NC膜-吸水層-基層”結構的樣品墊(2)；

所述結合墊、分析膜和吸水墊均采用靜電紡絲的方式制備相應的片材。

2.根據權利要求1所述的一種HPV抗體快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述試紙條還包括底板(1)，所述樣品墊(2)、結合墊(3)、分析膜(4)和吸水墊(5)沿層析方向依次固定于底板(1)的一側面上，所述手柄(6)的一端與所述底板(1)相連。

3.根據權利要求1所述的一種HPV抗體快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述結合墊(3)的制備方法包括以下步驟：

a、將膠體金溶液的pH調節至6.0-6.4后與抗人IgG抗體合并反應15-20min，隨后加入BSA終止合并，依次經混勻、靜置及離心，得到抗人IgG抗體-納米金顆粒；

b、將硝酸纖維素顆粒使用乙醇溶解，采用靜電紡絲法制成片材，乙醇充分揮發后將步驟a中獲得的抗人IgG抗體-納米金顆粒經分散稀釋后涂覆在片材上，干燥后得到結合墊(3)。

4.根據權利要求1所述的一種HPV抗體快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述分析膜(4)的制備方法為：將硝酸纖維素顆粒使用乙醇溶解，采用靜電紡絲法制成片材，乙醇充分揮發后將HPV L1蛋白液和二抗間隔涂覆在片材上，經包被處理后進行干燥，分別在分析膜(4)上對應形成檢測帶(7)和質控帶(8)。

5.根據權利要求1所述的一種HPV抗體快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述吸水墊(5)的制備方法為：將高分子吸水樹脂顆粒使用乙醇溶解，采用靜電紡絲法制成片材，乙醇充分揮發后即得吸水墊(5)。