[發明專利]一種miRNAs原料液的提取方法在審

申請號：	201910607684.4	申請日：	2019-07-08
公開（公告）號：	CN110283815A	公開（公告）日：	2019-09-27
發明（設計）人：	胡小云	申請（專利權）人：	江蘇核泰生態科技有限公司
主分類號：	C12N15/10	分類號：	C12N15/10
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	225300 江蘇省泰州市陸***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	金銀花原料液稱取大規模工業化生產篩選環保保護食用安全顏色均勻植物提取質量均勻電子秤分選機可循環毒害保證
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【權利要求書】：

1.一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，所述方法包括：

S101：選取顏色都為黃色的金銀花，并保證金銀花的顏色均勻，然后使用分選機篩選出質量均勻的金銀花，然后使用電子秤稱取400g篩選出的金銀花，然后將稱取的400g金銀花均等的分成兩份，并將兩份金銀花分別標記為A、B；

S102：將A份金銀花與B份金銀花分別放入到兩個相同的金銀花清洗機內，使用金銀花清洗機去除A份金銀花與B份金銀花表面的雜質與殘留農藥，對A份金銀花與B份金銀花起到清洗、浸泡、殺菌消毒和固色的作用，然后將清洗后的A份金銀花與B份金銀花分別放在兩個相同的燒杯內，并將A份金銀花對應的燒杯標記為C，B份金銀花對應的燒杯標記為D；

S103：將C燒杯內的A份金銀花加入到中藥粉碎機內，通過中藥粉碎機將A份金銀花粉碎，并將A份金銀花的細胞壁擊破，同時將D燒杯內的B份金銀花放置在陰涼處以備后續使用；

S104：將中藥粉碎機粉碎后的A份金銀花倒入到反應釜內，并向反應釜內加入500ML的純凈水，然后將反應釜內部的溫度調節至30℃～120℃，通過反應釜震蕩攪拌5min-300min，使粉碎后的A份金銀花內部的miRNAs從細胞釋放出來，并進入到純凈水中，從而達到浸提的效果，從而制備出miRNAs初始原料液；

S105：然后將反應釜內部的miRNAs初始原料液倒出，并使其降溫至常溫狀態，然后使用粗過濾篩將miRNAs初始原料液中的雜質過濾出，然后使用細胞過濾篩將miRNAs初始原料液中的細碎雜質過濾出，從而得到最終的miRNAs原料液；

S106：使用定量RT-PCR方法對過濾后的miRNAs原料液進行檢測，如果檢測到miRNAs原料液中的miRNAs比重較小時，使用D燒杯內的B份金銀花重復S104、S105步驟，從新制備新的miRNAs原料液。

2.根據權利要求1所述的一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：

所述分選機利用空氣懸浮原理選取出重量相近的金銀花。

3.根據權利要求1所述的一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：

所述中藥粉碎機用于粉碎A份金銀花的時間為20s～600s，所述中藥粉碎機用于粉碎B份金銀花的時間為20s～600s。

4.根據權利要求1所述的一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：

所述中藥粉碎機粉碎后的A份金銀花和B份金銀花粒徑為25～800目。

5.根據權利要求1所述的一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：

所述粗過濾篩的目數為500目。

6.根據權利要求1所述的一種miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：

所述細胞過濾篩的目數為1800目。