[發(fā)明專(zhuān)利]一種油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910604962.0
• 申請(qǐng)日: 2019-07-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110272845A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李靜;王樹(shù)偉;王建紅;張獻(xiàn)國(guó);范合琴;王立強(qiáng);王振華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 鶴壁市人元生物技術(shù)發(fā)展有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12N1/14;C12N1/18;A23K10/12;A23K10/37;C05F5/00;C05F17/00;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/69;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州德勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41128
• 代理人: 王莉

1.一種油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑，總有效活菌數(shù)≥100億/g，其包括以下質(zhì)量百分?jǐn)?shù)的原料：光合細(xì)菌菌粉15%-25%、釀酒酵母粉6%-10%、枯草芽孢桿菌菌粉25%-35%、高溫芽孢桿菌菌粉35%-45%和米曲霉粉1.5%-2.5%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑，其特征在于，包括以下質(zhì)量百分?jǐn)?shù)的原料：沼澤紅假單胞菌菌粉20%、釀酒酵母粉8%、枯草芽孢桿菌菌粉30%、高溫芽孢桿菌菌粉40%和米曲霉粉2%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑，其特征在于，所述高溫芽孢桿菌菌粉中的高溫芽孢桿菌菌株來(lái)自于新鮮的雞糞，所述新鮮的雞糞經(jīng)過(guò)75℃-85℃高溫45-90分鐘處理后，用液體肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行50℃-60℃富集培養(yǎng)，再利用肉湯平板，50℃-60℃培養(yǎng)，根據(jù)菌落大小，篩選出生長(zhǎng)迅速的菌株，經(jīng)過(guò)鏡檢，具有芽孢即得到所述高溫芽孢桿菌菌株。

4.一種權(quán)利要求1或2或3所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，包括步驟：

活化培養(yǎng) 將光合細(xì)菌菌種、釀酒酵母種、枯草芽孢桿菌菌種、高溫芽孢桿菌菌種和米曲霉種分別接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng)，分別得到一代菌株；

擴(kuò)大培養(yǎng) 先分別對(duì)所述光合細(xì)菌的一代菌株、釀酒酵母的一代菌株、枯草芽孢桿菌的一代菌株、高溫芽孢桿菌的一代菌株和米曲霉的一代菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)，再分別接種到相應(yīng)的固體培養(yǎng)中進(jìn)行固體擴(kuò)大培養(yǎng)，然后分別風(fēng)干做成相應(yīng)的固體單菌，分別得到光合細(xì)菌菌粉、釀酒酵母粉、枯草芽孢桿菌菌粉、高溫芽孢桿菌菌粉和米曲霉粉；

制備菌劑 按照上述質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，將光合細(xì)菌菌粉、釀酒酵母粉、枯草芽孢桿菌菌粉、高溫芽孢桿菌菌粉和米曲霉粉均勻混合，即制得所述油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述高溫芽孢桿菌來(lái)自于新鮮的雞糞，所述新鮮的雞糞經(jīng)過(guò)75℃-85℃高溫45-90分鐘處理后，用肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行50℃-60℃富集培養(yǎng)，再利用肉湯平板，于50℃-60℃培養(yǎng)，根據(jù)菌落大小，篩選出生長(zhǎng)迅速的菌株，經(jīng)過(guò)鏡檢，具有芽孢，即得到高溫芽孢桿菌原始種。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述高溫芽孢桿菌的制備方法包括：先對(duì)所述高溫芽孢桿菌的一代菌株進(jìn)行液體發(fā)酵罐培養(yǎng)得到高溫芽孢桿菌液體種，再按照8%-12%的接種量對(duì)所述高溫芽孢桿菌液體種固體培養(yǎng)40-56 h后，風(fēng)干做成高溫芽孢桿菌固體單菌，即得所述高溫芽孢桿菌菌粉。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述光合細(xì)菌菌粉的制備方法包括：先將光合細(xì)菌的一代菌株在好氧條件下暗培養(yǎng)20-28 h，再在光照厭氧條件下培養(yǎng)，直至轉(zhuǎn)成暗紫色，然后再按照1:1的重量比吸附到麩皮上，風(fēng)干做成光合細(xì)菌固體單菌粉，即得到所述光合細(xì)菌菌粉。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母粉的制備方法包括：先對(duì)所述釀酒酵母的一代菌株進(jìn)行液體發(fā)酵罐培養(yǎng)得到酵母液體種，再按照8%-12%的接種量將所述酵母液體種固體培養(yǎng)40-56 h，然后風(fēng)干酵母的固體培養(yǎng)基做成酵母固體單菌粉，即得到釀酒酵母粉菌粉。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌菌粉的制備方法包括：先對(duì)所述枯草芽孢桿菌的一代菌株進(jìn)行液體發(fā)酵罐培養(yǎng)得到枯草芽孢桿菌液體種，再按照8%-12%的接種量將所述枯草芽孢桿菌液體種進(jìn)行固體培養(yǎng)32-45 h，然后風(fēng)干枯草芽孢桿菌的固體培養(yǎng)基做成枯草芽孢桿菌固體單菌，得到所述枯草芽孢桿菌菌粉。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的油料粕發(fā)酵復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，所述米曲霉粉的制備方法包括：先對(duì)所述米曲霉的一代菌株進(jìn)行液體發(fā)酵罐培養(yǎng)得到米曲霉液體種，再按照8%-12%的接種量將所述米曲霉液體種固體培養(yǎng)55-65 h，然后風(fēng)干所述米曲霉的固體培養(yǎng)基做成米曲霉固體單菌，即制得所述米曲霉粉。