[發明專利]通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法及應用在審
| 申請號: | 201910604380.2 | 申請日: | 2019-07-05 |
| 公開(公告)號: | CN112175091A | 公開(公告)日: | 2021-01-05 |
| 發明(設計)人: | 任黎明;陳臻;段海峰 | 申請(專利權)人: | 賽納生物科技(北京)有限公司 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N9/12;C12N15/62;C12Q1/6869 |
| 代理公司: | 北京嘉途睿知識產權代理事務所(普通合伙) 11793 | 代理人: | 彭成 |
| 地址: | 100176 北京市大*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 通過 功能 結構 嫁接 提高 聚合 片段 活性 方法 應用 | ||
1.一種通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法,其特征在于:將Sso7d DNA結合蛋白的基因與野生型Bst DNA聚合酶大片段的基因連接,并轉入原核表達載體進行表達、純化;
所述Sso7d DNA結合蛋白的基因序列如下所示,如SEQ ID NO.1所示;
所述野生型Bst DNA聚合酶大片段的基因序列如下所示,如SEQ ID NO.2所示。
2.根據權利要求1所述的通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法,其特征在于:通過Linker將Sso7d DNA結合蛋白的基因與野生型Bst DNA聚合酶大片段的基因連接。
3.根據權利要求2所述的通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法,其特征在于:所述Linker序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根據權利要求3所述的通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法,其特征在于:通過Linker將Sso7d DNA結合蛋白的基因與野生型Bst DNA聚合酶大片段的基因連接后基因序列如SEQ ID NO.5所示。
5.權利要求1~4中任一項所述的通過功能結構域嫁接提高聚合酶大片段活性的方法在改變Bst DNA聚合酶大片段活性中的應用。
6.一種Sso7d-Bst DNA聚合酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
7.一種DNA聚合的方法,其特征在于:利用權利要求6所述的Sso7d-Bst DNA聚合酶。
8.一種基因測序的方法,其特征在于:測序反應液中包含權利要求6所述的Sso7d-BstDNA聚合酶。
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