[發(fā)明專(zhuān)利]一種黑蒜中不同分子量的類(lèi)黑精成分的分離方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910584217.4
• 申請(qǐng)日: 2019-07-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110214953A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫永躍;王月麗;趙寧;彭嬌嬌
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天津理工大學(xué);天津先德科技有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): A23L33/105
• 分類(lèi)號(hào): A23L33/105
• 代理公司: 天津盛理知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12209
• 代理人: 趙瑤瑤

1.一種黑蒜中不同分子量的類(lèi)黑精成分的分離方法，其特征在于：步驟如下：

⑴黑蒜中類(lèi)黑精成分的粗提取

稱(chēng)取黑蒜成品原料，無(wú)菌操作的條件下剝成蒜瓣；溶于無(wú)菌蒸餾水中，蒸餾水：蒜瓣的料液比為1：1.8～3，在膠體磨中打漿；得到的漿液再用蒸餾水在4℃下萃取，兩次添加的蒸餾水的體積比為1：1；所得混合物以1.1×10⁴rpm離心15min；取上清液，過(guò)濾；將所得濾液通過(guò)二氯甲烷洗脫萃取脫脂，所述黑蒜成品原料：二氯甲烷的比例g：mL為1：1.25～1.5；

⑵超濾膜分離：取類(lèi)黑精粗提取液，使用攪拌的超濾裝置在室溫下對(duì)其進(jìn)行連續(xù)超濾，所述裝置具有分子量截止值分別50、10和1kDa的再生纖維素分離膜，以獲得不同分子量范圍的組分，分別為分子量>50kDa的高分子量、分子量為10-50kDa的中等分子量和分子量<1kDa的低分子量；為了控制分離的效率，測(cè)量回收的濾液中的電導(dǎo)率直至它的值低于20μs.cm^-1；平均而言，對(duì)于每個(gè)膜孔徑，以下程序重復(fù)10次：保留物截留的部分作為分子量>50kDa的高分子量物質(zhì)回收，并且使所有濾液的體積恢復(fù)至類(lèi)黑精粗提取液的原始體積后再使用10kDa截留膜進(jìn)行新的超濾，使用1kDa對(duì)10kDa的濾液進(jìn)行新的超濾；在該過(guò)程結(jié)束時(shí)，回收對(duì)應(yīng)于50、10和1kDa滲余物的三個(gè)級(jí)分和對(duì)應(yīng)于1kDa截留濾液的一個(gè)級(jí)分；

⑶冷凍干燥：液體部分將其在預(yù)先稱(chēng)重的容器中冷凍并冷凍干燥至達(dá)到穩(wěn)定的重量后，儲(chǔ)存于干燥器中用于進(jìn)一步分析；冷凍干燥后所得產(chǎn)品為色澤不同的粉末；每部分的產(chǎn)量用以下分?jǐn)?shù)權(quán)重計(jì)算分?jǐn)?shù)方程式，結(jié)果以百分比報(bào)告；

組分萃取率％＝凍干部分(g)÷用于提取的黑蒜粉(g)×100 方程(1)；

⑷成分分析：比較分離到的各個(gè)組分的成分；利用公式1計(jì)算出不同分子量組分的產(chǎn)率；稱(chēng)量樣品，測(cè)C、H、N、S的相對(duì)含量，結(jié)果以百分比報(bào)告；

⑸尺寸排阻色譜檢測(cè)分離的各組分的分子量：分別稱(chēng)量不同分子量部分的類(lèi)黑精凍干粉溶于0.1M的NaNO₃水溶液中，類(lèi)黑精凍干粉：NaNO₃水溶液的比例mg：ml為5：1，置于37℃搖床震蕩12h使其充分溶解；RI、RALS、LALS三檢測(cè)器聯(lián)用的尺寸排阻色譜，流動(dòng)相為0.1M的NaNO₃水溶液，流速為0.7ml/min，色譜柱為A6000M，柱溫為35℃；樣品進(jìn)樣量為100μL；

⑹理化性質(zhì)分析：利用紫外光譜、熒光光譜分析各組分的紫外吸收和熒光特性，確認(rèn)分離到的各個(gè)組分為從黑蒜成品中提取分離到的類(lèi)黑精成分。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑蒜中不同分子量的類(lèi)黑精成分的分離方法，其特征在于：所述步驟⑴中膠體磨為實(shí)驗(yàn)室膠體磨。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑蒜中不同分子量的類(lèi)黑精成分的分離方法，其特征在于：所述步驟中⑵中獲得不同分子量范圍的組分后，當(dāng)通過(guò)膜后保留物的體積達(dá)到類(lèi)黑精粗提取液1/5體積時(shí)，進(jìn)行再加水至類(lèi)黑精粗提取液的原始體積，并重復(fù)該過(guò)程數(shù)次。