[發明專利]一種槐糖脂發酵液中異構產物的分離純化方法

有效

• 申請號: 201910583672.2
• 申請日: 2019-07-01
• 公開（公告）號: CN110330538B
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 石森;黃長榮;李晶;黃真真;王勤隆;周蕓;孔令曉;劉照;任娟
• 申請（專利權）人: 萬華化學集團股份有限公司
• 主分類號: C07H13/06
• 分類號: C07H13/06;C07H1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種發酵法生產槐糖脂的產物分離純化方法，包含以下步驟：

(1)使用工程菌發酵生產槐糖脂結束發酵后，用水稀釋發酵液，之后分離菌體得到含槐糖脂的無菌液；

(2)無菌液通過樹脂進行吸附，吸附結束后用洗脫劑對樹脂進行洗脫，收集洗脫液，濃縮得到酸型槐糖脂產品；所述的樹脂選自大孔樹脂、堿性陰離子樹脂；

(3)收集經樹脂吸附后的無菌液，加入絮凝劑，分離沉淀物和溶液，溶液除水，得到內酯型槐糖脂產品。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)結束發酵后，用3-5倍體積水稀釋發酵液，然后用過濾方式除菌體，得到無菌液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述的樹脂選自大孔樹脂、堿性陰離子樹脂，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂，所述堿性陰離子樹脂為丙烯酸系弱堿性陰離子樹脂；所述樹脂的裝填長徑比為5：1-20：1；所述樹脂的體積為待吸附無菌液總體積的1/50-1/10。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述樹脂的裝填長徑比為8：1-10：1。

5.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，步驟(2)中無菌液進行吸附時，流量控制為每小時1-5倍樹脂體積。

6.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，步驟(2)中無菌液進行吸附時，流量控制為每小時2-3倍樹脂體積。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(2)中吸附結束后，用洗脫劑對樹脂進行洗脫，堿性陰離子樹脂的洗脫劑為濃度0.1-5wt％的氫氧化鈉和/或氫氧化鉀水溶液，大孔樹脂的洗脫劑為乙醇。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，堿性陰離子樹脂的洗脫劑為濃度0.5％-1.5wt％的氫氧化鈉和/或氫氧化鉀水溶液。

9.根據權利要求1或7所述的方法，其特征在于，洗脫劑用量為20-50倍樹脂體積，洗脫劑流量為每小時5-20倍樹脂體積。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，洗脫劑流量為每小時8-10倍樹脂體積。

11.根據權利要求1或7所述的方法，其特征在于，步驟(2)中洗脫液用減壓蒸發的方式進行濃縮，最終得到槐糖脂濃度為30-50wt％的酸型槐糖脂產品，酸型槐糖脂比例不低于98％。

12.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)收集經樹脂吸附后的無菌液，加入絮凝劑，靜置待固體沉淀析出完畢后，分離沉淀物和液體，液體減壓蒸發除去溶劑水，得到內酯型槐糖脂產品，內酯型槐糖脂比例不低于98％。

13.根據權利要求1或12所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述的絮凝劑選自聚丙烯酸鈉、聚丙烯酰胺、明膠、海藻酸鈉中的一種或多種，絮凝劑加入的質量為經樹脂吸附后的無菌液質量的0.1-1％。

14.根據權利要求13所述的方法，其特征在于，絮凝劑加入的質量為經樹脂吸附后的無菌液質量的0.3-0.5％。

15.根據權利要求1、2、3、7、12中任一項所述的方法，其特征在于，酸型和內酯型槐糖脂總收率不低于92％。