[發明專利]一種槐糖脂發酵液中異構產物的分離純化方法

有效

• 申請號: 201910583672.2
• 申請日: 2019-07-01
• 公開（公告）號: CN110330538B
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 石森;黃長榮;李晶;黃真真;王勤隆;周蕓;孔令曉;劉照;任娟
• 申請（專利權）人: 萬華化學集團股份有限公司
• 主分類號: C07H13/06
• 分類號: C07H13/06;C07H1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種發酵法生產槐糖脂的產物分離純化方法，包括以下步驟：1.發酵法生產槐糖脂結束發酵后先稀釋發酵液，然后過濾分離菌體，得到含有槐糖脂的無菌液，2.無菌液通過樹脂進行吸附，吸附結束后的樹脂用洗脫劑進行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到酸型槐糖脂純品，3.經過樹脂吸附后的無菌液加入絮凝劑，靜置后進行固液分離，液體蒸干溶劑，即可得到內酯型槐糖脂純品。本方法的槐糖脂總回收率大于92％，同時能夠高效分別獲得兩種構型的槐糖脂產品，每種產品單一構型產物比例不低于98％；與傳統分離方法相比，本發明分離純化槐糖脂的工藝簡單、無復雜設備、不使用有毒有害溶劑、三廢量少、綠色環保。

技術領域

本發明屬于分離純化技術領域，具體涉及一種槐糖脂發酵液中異構產物的分離純化方法。

技術背景

槐糖脂是一種生物表面活性劑，具有生物可降解性、低生態毒性、環境友好等特點，被廣泛應用于各個領域。槐糖脂是由酵母菌大規模發酵生產的表面活性劑，發酵產量較高，可達400g/L，現已實現工業化生產。

槐糖脂具有酸型和內酯型兩種結構，如下式所示，A為酸型槐糖脂，B為內酯型槐糖脂。不同結構的槐糖脂具有不同理化性質，一般而言，內酯型槐糖脂有較好的降低表面張力的能力和抗菌活性，而酸型槐糖脂有較好的泡沫形成能力和溶解性。內酯型槐糖脂適用于油田采油、環境修復等領域，酸型槐糖脂適合用于日化及家庭護理領域。

目前，常規的工業化分離方式得到的槐糖脂為酸型和內酯型的混合物，如專利CN1839892B介紹了用乙酸乙酯萃取槐糖脂發酵液，之后減壓蒸餾得到槐糖脂混合物。這種方法在分離槐糖酯時只能得到兩種構型的混合物，且使用有機溶劑，不環保。

專利CN105886572A介紹了一種內酯型槐糖脂的制備方法，要求初始發酵液中內酯型槐糖脂比例必須高于70％，然后對發酵液進行酸化處理，再經過高溫反應，使得發酵液中的酸型槐糖脂轉化成內酯型槐糖脂，最后用乙酸乙酯進行萃取，得到內酯型占主導的槐糖脂，該方法雖然能夠得到以內酯型為主的產品，但要求初始發酵液中的內酯型產品不低于70％，并且在分離過程中經過了高溫反應，使得酸型進行了轉化，分離工藝復雜，并且只能得到一種內酯型產品。

單批次原料通過分離可以分別獲得高純度酸型和內酯型槐糖脂產品的工藝尚未有報道。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中存在的問題，提供一種高收率、高純度、同時獲得酸型和內酯型槐糖脂產品的分離純化方法。

為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種槐糖脂發酵液中異構產物的分離純化方法，包含以下步驟：

(1)使用工程菌發酵生產槐糖脂結束發酵后，用水稀釋發酵液，之后分離菌體得到含槐糖脂的無菌液；

(2)無菌液通過樹脂進行吸附，吸附結束后用洗脫劑對樹脂進行洗脫，收集洗脫液，濃縮得到酸型槐糖脂產品；

(3)收集經樹脂吸附后的無菌液，加入絮凝劑，開始有固體析出，靜置待固體析出完全后，分離固體沉淀和液體，將液體減壓蒸發除去水，得到內酯型槐糖脂產品，內酯型槐糖脂比例不低于98％。

本發明方法中，優選地，步驟(1)所述工程菌為酵母菌。

本發明方法中，步驟(1)結束發酵后，優選用3-5倍發酵液體積的水稀釋發酵液，然后用過濾的方式除菌體，得到無菌液。

本發明方法中，步驟(2)中所述的樹脂可以為堿性陰離子樹脂，優選丙烯酸系弱堿性陰離子樹脂，例如上海華震335弱堿性離子交換樹脂、315弱堿性離子交換樹脂、堿性陰離子吸附樹脂155、堿性陰離子樹脂HZ-016；也可以為大孔樹脂，所述大孔樹脂優選D101型大孔吸附樹脂；所述樹脂的裝填長徑比為5：1-20：1，優選8：1-10：1；所述樹脂的體積為待吸附無菌液總體積的1/50-1/10。