[發明專利]一種包裝飲用水中微生物的靈敏檢測方法

有效

• 申請號: 201910582662.7
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110272937B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 羅慧琳;張志剛;鐘華林
• 申請（專利權）人: 華潤怡寶飲料（中國）有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;G01N15/06
• 代理公司: 深圳市精英專利事務所 44242
• 代理人: 王文伶

1.一種包裝飲用水中微生物的初篩檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、采集檢測樣品中的微生物；同時，以無菌水作為樣品以相同的方法進行處理，作為陰性對照樣；

S2、將采集到的微生物轉移接種至CN液體培養基中，并將接種后的CN液體培養基于振蕩培養裝置中，恒定溫度培養24h，以目標微生物的最適生長條件為培養條件；

所述陰性對照樣隨同檢測樣品一起，以相同的方式接種和培養；

S3、將經培養后的陰性對照樣及檢測樣品取出，辨別陰性對照樣與檢測樣品兩者間培養液的濁度差異；

使用濁度計測量若干CN液體培養基的本體濁度值并計算平均濁度值，依此建立CN液體培養基的本底濁度質控表；若陰性對照樣的濁度值小于或等于1.5倍CN液體培養基平均濁度值，則該陰性對照樣為有效陰性對照樣；比較檢測樣品與有效陰性對照樣兩者間培養液的濁度差異，若檢測樣品的濁度值大于1.5倍有效陰性對照樣的濁度值，則判定該檢測樣品為初篩可疑樣；否則判定該檢測樣品無微生物檢出；

所述的微生物為銅綠假單胞菌。

2.根據權利要求1所述的包裝飲用水中微生物的初篩檢測方法，其特征在于，步驟S3后還包括步驟S4，將初篩可疑樣劃線至瓊脂培養基上，分離培養出單個菌落并對菌落進行鑒定，根據菌落鑒定情況報告微生物檢出結果。

3.根據權利要求1所述的包裝飲用水中微生物的初篩檢測方法，其特征在于，步驟S1中，通過離心分離法或濾膜分離法處理100-1000mL檢測樣品，使檢測樣品中潛在的微生物與樣液分離以采集潛在的微生物，或通過直接接種的方式采集檢測樣品中潛在的微生物。

4.根據權利要求3所述的包裝飲用水中微生物的初篩檢測方法，其特征在于，步驟S1中，離心分離法所用的轉速為2000-8000rpm，時間為2-10min，溫度為4-30℃。

5.根據權利要求3所述的包裝飲用水中微生物的初篩檢測方法，其特征在于，步驟S1中，濾膜分離法所用濾膜為孔徑≤0.45μm的無菌濾膜。