[發明專利]一種發酵高產大環內酰胺化合物的海洋小單孢菌株及應用

有效

• 申請號: 201910580143.7
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110283747B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 孫菲;趙薇;周劍;江紅
• 申請（專利權）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/10;C12R1/29
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

本發明屬于微生物發酵技術領域，具體涉及一種發酵高產大環內酰胺化合物的海洋小單孢菌株及其應用。本發明通過對現有發酵產大環內酰胺化合物FW05328?1的海洋小單孢菌株FIM05?328進行誘變育種，獲得一株能夠高產大環內酰胺化合物FW05328?1的突變株Micromonospora sp.FIM?MA181224。該菌株能有效提高發酵液中化合物FW05328?1的含量，在10L?500L發酵罐的發酵實驗中，Micromonospora sp.FIM?MA181224發酵產生化合物FW05328?1的效價達到249.8mg/L，與原始菌株FIM05?328的發酵效價相比，大幅度提高了大環內酰胺化合物FW05328?1的產生能力，為FW05328?1的工業化生產和后續臨床推廣提供了有利支持。

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域，具體涉及一種發酵高產大環內酰胺化合物的海洋小單孢菌株及其應用。

背景技術

近年來，腫瘤的發病率及死亡率呈上升趨勢，癌癥已成為嚴重危害人類健康的第一殺手。目前，腫瘤的治療仍以藥物治療為主，因此，抗腫瘤藥物的研發具有巨大的市場前景，而不斷研究開發新的高效低毒的抗腫瘤藥物具有重要意義。

微生物資源為創新藥物研究提供無窮的源泉，從微生物次生代謝產物中尋找有活性的化合物作為先導化合物創制新藥是世界藥學工作者公認的有效途徑之一。微生物豐富多樣的次生代謝產物為化學藥物新藥研究與開發提供了大量極為珍貴的模式結構和藥物前體小分子，是藥物發現源頭創新和持續創新的重要物質基礎，對整個創新藥物的研究具有決定性意義。

福建省微生物研究所于2017年首次報道了從海洋小單孢菌FIM05-328的微生物次級代謝產物中分離到一個新結構的26元多烯大環內酰胺類化合物FW05328-1(詳見中國專利CN107287131A)，并對化合物FW05328-1的結構進行鑒定，以及對化合物FW05328-1的生物活性進行初步研究。

研究發現，該大環內酰胺化合物FW05328-1是一個新結構的化合物，其在體外對人食管鱗癌細胞株KYSE30、KYSE180、EC109具有優良的抑制活性，對人食管鱗癌細胞株EC109的抑制活性尤為突出，與結構相似物Salinilactam A及藥物順鉑相比，其抑制活性分別是Salinilactam A的165倍、順鉑的95倍，使其成為具有較好研究前景的抗腫瘤藥物先導物。

但是，FW05328-1作為新結構化合物，在該化合物的在先研究中，僅限于對搖瓶發酵工藝的初步發酵研究，且其整體發酵效價極低，對后續提取工藝極為不利，難以應用于大規模發酵生產?，F有研究中尚無關于大環內酰胺化合物FW05328-1規?；l酵生產工藝的研究及報道，為其后續應用造成了極大的限制。

發明內容

為此，本發明所要解決的技術問題在于提供一株發酵高產大環內酰胺化合物FW05328-1的海洋小單孢菌株，以解決現有技術中FW05328-1化合物的發酵產量較低的問題；

本發明所要解決的第二個技術問題在于提供一種利用上述菌株發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法。

為解決上述技術問題，本發明所述的一種海洋小單孢菌菌株，其分類命名為Micromonospora sp.FIM-MA181224，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC NO.17139。

本發明所述海洋小單孢菌是以保存的海洋小單孢菌FIM05-328(詳見中國專利CN107287131A，保藏編號為CGMCC NO.13933)為出發菌株進行多輪誘變獲得。

本發明還公開了所述的海洋小單孢菌株在發酵生產大環內酰胺化合物中的應用。

具體的，所述大環內酰胺化合物包括具有如下結構的化合物FW05328-1：