[發明專利]一種發酵高產大環內酰胺化合物的海洋小單孢菌株及應用

有效

• 申請號: 201910580143.7
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110283747B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 孫菲;趙薇;周劍;江紅
• 申請（專利權）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/10;C12R1/29
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

1.一種海洋小單孢菌菌株，其分類命名為Micromonospora sp.FIM-MA181224，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC NO.17139。

2.權利要求1所述的海洋小單孢菌株在發酵生產大環內酰胺化合物中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述大環內酰胺化合物包括具有如下結構的化合物FW05328-1：

4.一種發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，包括將權利要求1所述的海洋小單孢菌接種于適宜發酵培養基中進行發酵培養的步驟。

5.根據權利要求4所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述發酵培養基包括如下質量含量的組分：可溶性淀粉0.8-1.2％，蛋白胨0.4-0.7％，黃豆餅粉0.15-0.30％，酵母粉0.15-0.25％，K₂HPO₄·3H₂O 0.03-0.06％，CaCO₃ 0.08-0.12％，海鹽0.8-1.2％，調pH值6.2-6.8。

6.根據權利要求5所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述發酵培養步驟的條件為：以2.0-4.0％的接種量將種子液進行接種，控制罐壓0.02-0.04Mpa，控制轉速200-240rpm，通氣0.8-1.2vvm，于26-30℃進行發酵培養5-7d。

7.根據權利要求6所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述發酵培養步驟的條件為：以2.0％的接種量進行接種，控制罐壓0.03Mpa，發酵前期控制轉速200r/min，通氣1.0vvm，隨著菌絲的增長，當菌濃達到7％時，提高轉速至220r/min，并逐步提高轉速至240r/min。

8.根據權利要求4-7任一項所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述方法還包括將所述菌株接種于種子培養基中進行種子液培養的步驟，所述種子培養基包括如下質量含量的組分：玉米淀粉0.4-0.8％，蛋白胨0.4-0.8％，豆粕0.3-0.6％，酵母粉0.2-0.5％，K₂HPO₄·3H₂O 0.03-0.06％，CaCO₃0.08-0.12％，海鹽1.4-2.0％，自來水配制，調pH值pH7.0-7.4。

9.根據權利要求8所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述種子液培養步驟包括搖瓶種子液培養及種子罐培養步驟；

所述搖瓶種子液培養步驟條件為：將新鮮斜面挖塊接入所述種子培養基，于27-29℃、控制轉速200-240r/min培養68-80h得到搖瓶種子培養液；

所述種子罐種子液培養步驟條件為：將培養好的搖瓶種子培養液以1.5-2.5％的接種量接種到含所述種子培養基的種子罐中，控制溫度27-29℃，罐壓0.02-0.04Mpa，控制轉速200-240r/min，發酵40-56h得到種子液。

10.根據權利要求9所述的發酵生產大環內酰胺化合物FW05328-1的方法，其特征在于，所述方法還包括將所述菌株接種于高氏天冬素固體斜面培養基進行活化培養的步驟，所述固體斜面培養基包括如下質量含量的組分：可溶性淀粉1.5-3.5％，L-天冬素0.04-0.06％，KNO₃ 0.08-0.12％，K₂HPO₄·3H₂O 0.04-0.06％，NaCl 0.04-0.06％，MgSO₄·7H₂O 0.04-0.06％，CaCO₃ 0.08-0.12％，瓊脂1-2％，調pH值pH7.0-7.4。