[發(fā)明專利]壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910577730.0
• 申請(qǐng)日: 2019-06-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110243988B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 寧小清;朱智德;張文濤;銀勝高;黃薏霏;談遠(yuǎn)鋒;韋威
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/86
• 代理公司: 南寧市吉昌知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 45125
• 代理人: 林鵬

本發(fā)明屬于中藥材指紋圖譜領(lǐng)域，具體涉及一種壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法。所述壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法，以白花九里明主要成分咖啡酸為參照物，據(jù)此獲得壯藥白花九里明共有模式指紋圖譜。指紋圖譜共有色譜峰10個(gè)，能夠充分反應(yīng)白花九里明藥材中化學(xué)成分，信息量較豐富，方法重現(xiàn)性良好，對(duì)控制藥材質(zhì)量和鑒別藥材優(yōu)劣提供了更有力的理論依據(jù)，提高了壯藥白花九里明的質(zhì)量控制和真?zhèn)舞b別水平，實(shí)現(xiàn)了快速，準(zhǔn)確地鑒別白花九里明的真?zhèn)蝺?yōu)劣。

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及中藥材指紋圖譜領(lǐng)域，具體涉及一種壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法。

【背景技術(shù)】

白花九里明為菊科艾納香屬植物Blumea megacephala(Randeria)Chang etTseng的地上部分，產(chǎn)于云南、四川、貴州、廣西、廣東、湖南南部、江西南部、福建及臺(tái)灣等省區(qū)。白花九里明在廣西壯族民間常用水煎服治療產(chǎn)后流血過(guò)多。

中藥指紋圖譜(fingerprinting)是借用DNA指紋圖譜發(fā)展而來(lái)。最先發(fā)展起來(lái)的是中藥化學(xué)成分色譜指紋圖譜，特別是高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜。HPLC具有很高的分離度，可把復(fù)雜的化學(xué)成分進(jìn)行分離而形成高低不同的峰組成一張色譜圖，這些色譜峰的高度和峰面積分別代表了各種不同化學(xué)成分和其含量。中藥指紋圖譜的研究和建立，對(duì)于提高中藥質(zhì)量，促進(jìn)中藥現(xiàn)代化具有重要意義。

目前壯藥白花九里明主要進(jìn)行了性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和含量測(cè)定等，這些方法存在信息量小、樣品化學(xué)成分體現(xiàn)不全面、鑒別成分?jǐn)?shù)量不足等問(wèn)題，因此無(wú)法表現(xiàn)壯藥白花九里明整體質(zhì)量。如寧小清等(寧小清,盧汝梅,黃麗貞等.壯藥白花九里明化學(xué)成分研究[J].中藥材,2016,39(11):2536-2538.)對(duì)白花九里明有效成分進(jìn)行研究，對(duì)兒茶酸、綠原酸和咖啡酸含量進(jìn)行了測(cè)定。其僅以其中幾種成分的含量為指標(biāo)確定藥材的質(zhì)量?jī)?yōu)劣。然而，壯藥(中藥)具有復(fù)雜的化學(xué)成分，有效成分多，未知成分多，不同成分或功效之間相互影響，任何一種活性成分都無(wú)法全面的反映該藥的總體質(zhì)量與療效，所以很難僅依靠一種或幾種成分來(lái)評(píng)價(jià)中藥的有效性和專屬性。

美國(guó)食品與藥品管理局(FDA)在有關(guān)植物藥物質(zhì)和植物藥產(chǎn)品部分，已將指紋圖譜引入質(zhì)量控制中；世界衛(wèi)生組織(WHO)在其草藥評(píng)價(jià)指南中指出，不能鑒別的植物藥質(zhì)譜和最終產(chǎn)品的有效成分，可采用色譜指紋圖譜鑒別特征成分或混合成分，保證產(chǎn)品質(zhì)量的一致性。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)壯藥白花九里明指紋圖譜的研究尚未見(jiàn)任何報(bào)道，本發(fā)明對(duì)壯藥白花九里進(jìn)行高效液相指紋圖譜研究，彌補(bǔ)了白花九里明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下的空白，為白花九里明藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了依據(jù)，并為更加科學(xué)、合理、規(guī)范地使用白花九里明，提高其臨床用藥的安全性提供了參考。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的是提供一種壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法。所述方法能夠?yàn)榘谆ň爬锩鞯蔫b別和質(zhì)量控制提供可靠依據(jù)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種壯藥白花九里明HPLC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：

(1)對(duì)照品溶液的制備：取咖啡酸對(duì)照品，加甲醇溶解制成對(duì)照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：精密稱取壯藥白花九里明藥材粗粉，加水，超聲提取，放冷至室溫，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；

(3)高效液相色譜測(cè)定：分別精密吸取步驟(1)的對(duì)照品溶液與步驟(2)的供試品溶液各10-20μl注入高效液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖，以咖啡酸色譜峰為參照峰，通過(guò)分析比較確定特征共有峰，即得所述白花九里明HPLC指紋圖譜；

其中，色譜條件為：以C18烷基鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以磷酸溶液為流動(dòng)相B組成的梯度洗脫液進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為300-350nm。