[發明專利]一種芪龍膠囊多成分液質定量測定方法及其應用

有效

• 申請號: 201910576130.2
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110412154B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 臧恒昌;劉瑞琛;李振;劉蘭玲;葉素艷;王秉政;魏永恒;高樂樂
• 申請（專利權）人: 山東大學;濟寧華能制藥廠有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/14;G01N30/04;G01N30/86
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄭平

本發明提供一種芪龍膠囊的多成分液質定量測定方法及其應用，通過HPLC?ESI?MS/MS分析方法，同時測定芪龍膠囊中芍藥苷、丹參酮ⅡA、丹參酚酸B、苦杏仁苷、毛蕊異黃酮苷及黃芪甲苷6個成分的含量，該方法簡單、快捷，靈敏度高，專屬性好，可為芪龍膠囊的質量控制提供參考依據。該方法具有準確可靠、靈敏度高、專屬性檢測限和定量限更低等優點，對藥材成分含量分析更具有效，因此具有良好的實際應用之價值。

技術領域

本發明屬于醫藥檢測技術領域，具體涉及一種芪龍膠囊多成分液質定量測定方法及其應用。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

芪龍膠囊由黃芪、地龍、丹參、當歸、赤芍、川芎、紅花、桃仁八種藥材經精工制作而成的中藥復方制劑，現已證明其含有多種生物活性物質，具有良好的益氣活血、化瘀通絡的療效，用于缺血性中風(腦梗塞)恢復期，癥見半身不遂，口舌歪斜，語言不清，偏身麻木，舌有瘀斑和瘀點。

中藥及其復方是在中醫理論指導下進行應用研究的，其成分復雜，發揮藥效的部位往往不是單一成分，而是群體療效，所以任何一種單一成分都是無法反應中藥及其復方的整體療效的。因此，對中藥及其復方進行宏觀地綜合分析將成為必然的趨勢。

目前針對芪龍膠囊的有效成分分析的研究較少，膠囊中的化合物成分較為復雜且不完全明確，芪龍膠囊質量標準僅利用對復方中的黃芪甲苷進行了含量測定。然而，如前所述，中藥藥效的產生是多種化學成分協同作用的結果，因此中藥的質量控制也應選擇多個化學成分作為檢測指標。芪龍膠囊成分較為復雜，單一成分作為指標成分具有一定的局限性。由于芪龍膠囊由多味中藥配伍精制而成，成分相對復雜，同時加工過程中藥用輔料的使用，造成其化學成分組成更為復雜。因此篩選能夠指示該膠囊整體質量變化情況的多種化學成分并建立一套針對所述多種化學成分進行定量檢測的方法存在較大難度。

發明內容

針對上述現有技術的不足，本發明提供了一種芪龍膠囊的多成分液質定量測定方法及其應用。本發明通過研究發現，芍藥苷、丹參酮ⅡA、丹參酚酸B、苦杏仁苷、毛蕊異黃酮苷及黃芪甲苷六種成分藥理活性高，含量豐富，作為混合標準品能夠很好的指示芪龍膠囊整體質量變化情況。因此，針對上述六種成分建立一套基于HPLC-ESI-MS/MS的定量檢測方法，該方法具有操作簡便、耗時短、選擇性高、靈敏度高、專屬性好、重復性好等優點。

本發明是通過如下技術方案實現的：

本發明的第一個方面，提供一種芪龍膠囊的多成分液質定量測定方法，檢測成分是芍藥苷、丹參酮ⅡA、丹參酚酸B、苦杏仁苷、毛蕊異黃酮苷和黃芪甲苷，具體測定方法包括：

(1)取芪龍膠囊粉末，加入甲醇超聲提取，離心取上清，得溶液A；向殘渣中加水，水浴加熱后離心取上清，得溶液B，混合溶液A和溶液B，即得供試品溶液；

(2)將步驟(1)得到的供試品溶液和對照品溶液進行高效液相色譜-質譜分析，采用梯度洗脫，流動相A相：含0.1％甲酸水溶液，流動相B相：乙腈。

優選的，所述步驟(1)中稱取芪龍膠囊粉末加入甲醇后超聲0.8-1.2h后于3500-4500r/min離心8-12min，離心后獲取上清溶液A，向殘渣中加入三蒸水，混均后于65-75℃水浴1.8-2.2h，3500-4500r/min離心8-12min，得到上清溶液B；溶液A與溶液B混合后加入流動相稀釋4-6倍(優選為5倍)，過濾，得供試品溶液；

優選的，所述芪龍膠囊粉末：甲醇的比為(180-220)mg：(4-6)mL(優選為200mg：5mL)；

優選的，所述溶液A與溶液B按照(4-6)：(6-8)體積比混合；有利于后續待測成分的富集和檢測；