[發明專利]一種檢測水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的方法

在審

• 申請號: 201910573678.1
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110108829A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 楊增光;崔鶴;蔣永毅;李興偉;于業志;韓婷婷;祝潤民
• 申請（專利權）人: 青島菲優特檢測有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所 11308
• 代理人: 趙帥

本發明公開了一種檢測水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的方法，樣品采用甲酸水分散，以叔丁基羥基茴香醚作為保護劑，用乙腈提取，經亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀蛋白，正己烷和C18柱凈化，堿性條件下減壓濃縮后，用液相色譜?串聯質譜儀進行測定，對樣品中呋喃苯烯酸鈉殘留量進行定性和定量分析。

技術領域

本發明屬于水產品檢測技術領域，是一種用高效液相色譜-串聯質譜法(LC/ESI-MS/MS)測定水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的方法。

背景技術

呋喃苯烯酸鈉屬于人工合成的呋喃類抗菌藥物，主要運用在動物和魚類的細菌預防和治療中。但是，世界衛生組織和聯合國糧農組織聯合報道硝基呋喃類藥物具有潛在的致突變和致癌性。為了保護消費者的健康,世界各國政府紛紛禁止了硝基呋喃類藥物在食品動物上所有目的的使用。我國在農業部235號公告中屬于禁止使用的藥物，在動物性食品中不得檢出。

目前,關于呋喃苯烯酸鈉檢測方法的研究報道很少,僅見于飼料、豬肉、雞肉、乳制品以及魚血清等的檢測，國內對于海產品中呋喃苯烯酸鈉的檢測標準很少且檢出限很高，不能滿足進出口貿易中各國對呋喃苯烯酸鈉殘留限量要求。

發明內容

本發明提供了一種檢測水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的方法，以解決水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢出限高的問題。

本發明提供了一種檢測水產品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的方法，樣品采用甲酸水分散，以叔丁基羥基茴香醚作為保護劑，用乙腈提取，經亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀蛋白，正己烷和C18柱凈化，堿性條件下減壓濃縮后，用液相色譜-串聯質譜儀進行測定，對樣品中呋喃苯烯酸鈉殘留量進行定性和定量分析。

優選地，包括以下步驟：

(1)以呋喃苯烯酸鈉標準物質配制標準儲備液，以50％甲醇水溶液將標準儲備液稀釋成不同濃度梯度的標準工作溶液。

(2)在水產品樣品中加入1％甲酸水分散混合，加入乙腈提取，以叔丁基羥基茴香醚作為抗氧化劑進行保護，超聲波萃取，得到樣品提取物；在水產品樣品中加入并加入不同濃度梯度的標準工作溶液后，再加入1％甲酸水分散混合，加入乙腈提取，以叔丁基羥基茴香醚作為抗氧化劑進行保護，超聲波萃取，得到加標提取物。

(3)在樣品提取物和加標提取物中均加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅去除蛋白后，再加入氯化鈉進行液液分配。取上層有機相并加入同等量的水，加入正己烷去除油脂后，取下層至固相萃取儀中，使用C18柱作為固相萃取柱，以50％乙腈水洗脫接收，洗脫液加入氯化鈉液液分配，加入氨水后，減壓濃縮，用50％甲醇水溶液定容，過0.22μm PTFE微孔濾膜后，得到樣品提取溶液和加標提取溶液。

(4)將標準工作溶液進LC/ESI-MS/MS中分析，繪制標準曲線。

(5)將樣品提取溶液和樣品加標溶液進LC/ESI-MS/MS中分析，進行定性和定量測定。

優選地，色譜條件為：

色譜柱：C18柱，50×2.1mm，1.8μm，或性能相當者。

流速：0.4mL/min。

柱溫：35℃。

進樣量：3μL。

梯度洗脫：流動相A為含5.0mmol/L醋酸銨的0.1％甲酸溶液，流動相B為乙腈。

可選地，質譜條件為：

離子化模式：電噴霧離子源ESI，負離子模式。

干燥器溫度：300℃。

干燥器流速：8L/min。

鞘氣溫度：350℃。

鞘氣流速：11L/min。