[發明專利]發酵培養基及發酵工藝

有效

• 申請號: 201910566095.6
• 申請日: 2019-06-27
• 公開（公告）號: CN110387390B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 莊英萍;薛佳韻;趙明霞;王澤建;孫慧婕;王永紅;儲炬
• 申請（專利權）人: 華東理工大學青島創新研究院;華東理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/18;C12N3/00;C12R1/465
• 代理公司: 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

本發明公開了一種發酵培養基，用于尼莫克汀發酵，所述培養基以豆油為碳源，并且所述培養基的pH值為7.0~7.5；其中，所述培養基中所述豆油的濃度為0.25?5.0克/升。本發明還公開了一種尼莫克汀的發酵工藝。本發明在藍灰色鏈霉菌生產尼莫克汀的過程中添加豆油，能夠有效地提高菌體合成，有利于生物量的積累和產物的生產，有效提高了目標產物尼莫克汀的產量。

技術領域

本發明涉及發酵培養技術領域，尤其涉及一種發酵培養基及使用該發酵培養基的發酵工藝。本發明所述發酵培養基及發酵工藝尤其適合于尼莫克汀的發酵。

背景技術

尼莫克?。∟emadectin）是一種米爾貝霉素類（Milbemycin）十六元大環內脂類抗生素，它是由藍灰色鏈霉菌（Streptomyces cyaneogriseus ssp. noncyanogenus）所生產的一種廣譜殺蟲劑。通過在尼莫克汀的第23位引入=N-OCH₃基團可半化學合成莫西克?。∕oxidectin），其具有高效、安全、環保以及不易產生抗藥性等特點，因此在農用驅蟲類殺蟲劑領域具有廣闊的應用前景。此外，莫西克汀在治療盤尾絲蟲病方面也十分有效。然而目前有關尼莫克汀的研究多集中于育種、分子機制以及毒理藥理等方面，關于發酵調控方面的研究較少。

為了盡可能發揮出尼莫克汀生產菌株藍灰色鏈霉菌的性能，本發明對尼莫克汀的發酵工藝進行優化，提高目標產物尼莫克汀的產量。

發明內容

本發明的目的在于提供一種發酵培養基，尤其是用于提高尼莫克汀產量的發酵培養基，以及應用該發酵培養基的發酵工藝。在本發明中，通過發酵培養基中添加豆油作為碳源，可以顯著提高目標產物尼莫克汀的產量。

為了實現上述目的，本發明首先提供一種發酵培養基，用于尼莫克汀的發酵。所述培養基以豆油為碳源，并且所述培養基的pH值為7.0~7.5；其中，所述培養基中所述豆油的濃度為0.25-5.0克/升。

在本發明一實施例中，所述發酵培養基的所述碳源還包括葡萄糖和麥芽糊精；其中，所述葡萄糖的濃度為15~25克/升，所述麥芽糊精的濃度為75~95克/升。

在本發明一實施例中，所述發酵培養基還包括氮源。

在本發明一實施例中，所述氮源包括：黃豆餅粉和玉米漿；其中，所述黃豆餅粉的濃度為20~30克/升，所述玉米漿的濃度為7~9克/升。

在本發明一實施例中，所述發酵培養基還包括助劑；所述助劑為穩定劑、微量元素、消泡劑中的至少一種。

在本發明一實施例中，所述穩定劑為碳酸鹽；所述微量元素為硫酸鹽、碳酸鹽、氯化鹽、鉬酸鹽中的至少一種。

在本發明一實施例中，所述硫酸鹽為硫酸鎂、硫酸銅、硫酸鋅或硫酸錳中的一種或幾種混合；所述氯化鹽為氯化鈷；所述鉬酸鹽為鉬酸鈉；所述碳酸鹽為碳酸鈣；所述發酵培養基中各組分的濃度為：硫酸鎂0.8-1.2克/升、硫酸銅0.009-0.011克/升、氯化鈷0.001-0.003克/升、硫酸鋅0.001-0.002克/升、硫酸錳0.001-0.002克/升、鉬酸鈉0.001-0.003克/升、碳酸鈣5-7克/升。

在本發明一較佳實施例中，提供一種發酵培養基，包含：碳源、氮源和助劑；其中，所述碳源包括豆油、葡萄糖和麥芽糊精；所述氮源包括：黃豆餅粉和玉米漿；所述助劑包括：硫酸鹽、碳酸鹽、氯化鹽、鉬酸鹽和消泡劑。優選地，各組份的濃度為：豆油0.25~5.0克/升、葡萄糖15~25克/升、麥芽糊精75~95克/升、黃豆餅粉20~30克/升、玉米漿7~9克/升。

優選地，所述硫酸鹽為硫酸鎂、硫酸銅、硫酸鋅和硫酸錳的混合物；所述碳酸鹽為碳酸鈣；所述鉬酸鹽為鉬酸鈉。優選地，所述碳酸鈣的濃度為5~7克/升，所述鉬酸鈉的濃度為0.001~0.003克/升。