[發明專利]一種提升人體脂肪含量的方法

在審

• 申請號: 201910563327.2
• 申請日: 2019-06-26
• 公開（公告）號: CN110305838A
• 公開（公告）日: 2019-10-08
• 發明（設計）人: 吳威
• 申請（專利權）人: 吳威
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;A61L27/36;A61L27/38;A61L27/22;A61L27/54
• 代理公司: 北京棘龍知識產權代理有限公司 11740
• 代理人: 謝靜

1.一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1、無菌條件下取人體皮下脂肪組織，將其移入預先盛有D-Hanks液的平皿，漂洗5～8次，用眼科剪去除脂肪組織中可見的血管和結締組織；

S2、然后剪切組織塊至8～10mm三小塊，用組織勻漿機180～200r/min勻漿至乳糜狀；繼而加入0.1％膠原酶I培養基消化30min，其間每5min振蕩1次；

S3、經200目不銹鋼細胞篩過濾去除未消化組織塊及大體積的脂肪細胞，將細胞懸液移入離心管，2000r/min離心5min；棄去離心后的上清液，加入細胞培養液清洗1次，2000r/min離心10min，制成細胞懸液，顯微鏡下計數，以5×104cells/mL接種細胞至培養皿或培養瓶，置入37℃、飽和濕度、5％CO2培養箱中培養；

S4、將S3中得到的的脂肪細胞群取100份放置在無菌恒壓環境下的培養皿中并在培養皿中加入5份0.5％濃度的穩定試劑；

S5、向脂肪細胞群添加自體高濃度血小板血漿PRP和重組人血管內皮生長因子VEGF-C；

S6、將經過步驟S4和步驟S6處理后的脂肪細胞群植入受試者中。

2.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述S2中的0.1％膠原酶I培養基為：將100mg膠原酶I溶解于100毫升D-Hanks液中，用5.6％NaHCO3溶液調節PH值至7.2～7.4，經0.22微米過濾器過濾、分裝，零下20℃保存備用。

3.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述S3中的中細胞培養液為：在DMEM/F12液中添加其體積10％的胎牛血清，經0.22微米過濾器過濾、分裝，4℃保存備用。

4.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述無菌膜穩定試劑包括氯化鈉、氯化鈣、氯化鉀、EDTA和蒸餾水。

5.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述脂肪細胞群和自體高濃度血小板血漿PRP的體積比為3：1。

6.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述重組人VEGF-C的劑量為每注入十六個脂肪細胞，對應加入1500IU重組人VEGF-C。

7.根據權利要求1所述的一種提升人體脂肪含量的方法，其特征在于：所述脂肪細胞群包括自體細胞和非自體細胞，且非自體細胞包括同種異體細胞和異種細胞，所述非自體細胞取自哺乳動物。