[發明專利]一種軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法

在審

• 申請號: 201910562224.4
• 申請日: 2019-06-26
• 公開（公告）號: CN110150151A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發明（設計）人: 任云;李強;李哲馨
• 申請（專利權）人: 重慶文理學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 徐云俠

1.一種軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

步驟a.采集軟棗獼猴桃小孢子發育處于單核期的花蕾，低溫濕潤條件下保存20-30h；

步驟b.將經過低溫保存后的花蕾進行消毒處理；

步驟c.分離花粉；

步驟d.將分離得到的花粉接種于愈傷組織誘導培養基中，暗培養10-15d；

步驟e.待步驟d中暗培養后的花粉形成肉眼可見的胚后，繼續暗培養至胚發育成成熟胚，再在植株分化培養基上培養40-50d，最后轉移到生根培養基上培養生根，即完成軟棗獼猴桃單倍體植株的培育。

2.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟a中，采集軟棗獼猴桃花粉處于單核靠邊期的花蕾。

3.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟a中所述低溫為1-5℃，所述保存時間為24h。

4.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟b中所述消毒處理過程為：先用質量分數為70-75％乙醇溶液浸潤花蕾20-40s，再在飽和漂白粉溶液中浸泡10-20min，之后用無菌水漂洗3-5次。

5.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟c中所述分離花粉的方法為：剝離花藥，將花藥在無菌條件下插接到無菌MS固體培養基上，當花藥自動裂開，移開花藥，收集花粉。

6.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導培養基的組分為：MS培養基+2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸+1mg/L KT+0.5-1.5mg/L玉米汁。

7.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟d中所述暗培養溫度為30-35℃。

8.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟e中所述暗培養條件為：25℃振蕩培養7-10d，振蕩頻率為60-100r/min。

9.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟e中所述植株分化培養基的組分為：MS培養基+0.01mg/L GA₃+150-200g/L香蕉泥，在所述植株分化培養基上培養的具體方法為：于20℃、16h光培養及8h暗培養交替、2000LUX光強條件下進行培養。

10.根據權利要求1所述的軟棗獼猴桃單倍體植株的培育方法，其特征在于，步驟e中所述生根培養基的組分為：1/2MS+0.1mg/L IBA+0.2g/L活性炭。