[發明專利]一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法及膠原蛋白生物原材料

有效

• 申請號: 201910553200.2
• 申請日: 2019-06-25
• 公開（公告）號: CN110386976B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 趙丹丹;胡俊;陳文烜
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C07K14/46;C07K1/14;C07K1/30;C12P21/06
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所 33233
• 代理人: 方惠琴

本發明公開了一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法及膠原蛋白生物原材料，白自組裝方法包括以下步驟：從草魚中提取獲得草魚魚鰾膠原蛋白；從草魚中提取獲得草魚肌原纖維蛋白；將提取的草魚肌原纖維蛋白酶解，得到草魚肌原纖維蛋白酶解產物；配置草魚魚鰾膠原蛋白醋酸溶液，在25?40℃、pH 6.0?7.0的條件下，加入氯化鈉溶液，與草魚肌原纖維蛋白酶解產物，進行草魚魚鰾膠原蛋白自組裝反應。本發明中草魚魚鰾膠原蛋白自組裝，利用草魚肌原纖維蛋白酶解產物促進了草魚魚鰾膠原蛋白自組裝，使其空間結構更為致密，提高草魚魚鰾膠原蛋白的性能。

技術領域

本發明屬于生物食品技術領域，具體涉及一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法及膠原蛋白生物原材料。

背景技術

草魚是我國四大家魚之首，因其高蛋白、低脂肪、捕獲量大等優點受到廣泛歡迎。但在草魚的使用和加工中，由于加工技術相對落后及飲食習慣等原因，魚鰾、魚皮、魚鱗等并未得到充分的利用，經常作為下腳料而遭遺棄。從草魚魚鰾中提取膠原蛋白既減少了資源浪費又增加了經濟效益。

膠原蛋白(collagen)是一類在生物體中廣泛存在的纖維狀結構蛋白質，根據其分子結構的差異，可分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等多種類型，其中Ⅰ型膠原蛋白是生物體中最主要的存在形式，其結構特征是由兩條α1和一條α2肽鏈形成的三螺旋結構。由于膠原蛋白具有良好的生物相容性、加工適應性和低免疫排斥性，近年來其作為醫學組織工程的主要生物材料在人造皮膚、人造血管、創傷修復等領域均得到了廣泛的應用。

膠原蛋白在體外自組裝形成高度有序的網狀結構，有利于細胞的黏附、增殖、擴散和遷移，具有良好的生物相容性、優異的力學性能、可生物降解性和弱抗原性。近年來，設計和合成具有優異性能的膠原蛋白自組裝生物功能材料已成為研究熱點。然而目前關于草魚魚鰾膠原蛋白自組裝行為的研究還未有報道。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，提高膠原蛋白的性能。

本發明的技術方案為：一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，包括以下步驟：

(1)從草魚中提取獲得草魚魚鰾膠原蛋白；

(2)從草魚中提取獲得草魚肌原纖維蛋白；

(3)將提取的草魚肌原纖維蛋白酶解，得到草魚肌原纖維蛋白酶解產物；

(4)配置草魚魚鰾膠原蛋白醋酸溶液，在25-40℃、pH 6.0-7.0的條件下，加入氯化鈉溶液，與草魚肌原纖維蛋白酶解產物，進行草魚魚鰾膠原蛋白自組裝反應。

作為優選，所述草魚魚鰾膠原蛋白醋酸溶液的濃度為1.0-4.0mg/mL。

作為優選，所述肌原纖維蛋白酶解產物的濃度為0.5-2.0mg/mL。

作為優選，所述氯化鈉溶液的濃度為50-100mmol/mL。

作為優選，所述步驟(1)中提取草魚魚鰾膠原蛋白的步驟包括：

將草魚魚鰾脫脂后充分水洗至中性，加入提取劑反應24-48h，離心，將上清液加入預冷氯化鈉鹽析，靜置，再離心取沉淀，上清液重復鹽析操作，合并沉淀用醋酸溶解，透析，真空冷凍干燥后保藏待用。具體過程為：草魚魚鰾脫脂后充分水洗至中性，加入0.5M醋酸(1:10，w/v)、0.1％(w/v)3000U/mg胃蛋白酶，反應24-48h，5000r/min下離心20min，上清液加入預冷氯化鈉鹽析，靜置4h，再離心取沉淀，上清液重復鹽析操作，合并沉淀用10倍體積0.5M醋酸溶解，透析，真空冷凍干燥后-20℃保藏待用。

作為優選，所述步驟(2)中提取獲得草魚肌原纖維蛋白的步驟包括：

將草魚魚肉剁碎后，加入預冷氯化鈉溶液進行勻漿，并置于冰浴中攪拌，過濾，離心之后，取沉淀再加入預冷氯化鈉溶液勻漿、離心，循環清洗，所得沉淀即為草魚肌原纖維蛋白。