[發明專利]一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法及膠原蛋白生物原材料

有效

• 申請號: 201910553200.2
• 申請日: 2019-06-25
• 公開（公告）號: CN110386976B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 趙丹丹;胡俊;陳文烜
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C07K14/46;C07K1/14;C07K1/30;C12P21/06
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所 33233
• 代理人: 方惠琴

1.一種草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)從草魚中提取獲得草魚魚鰾膠原蛋白；

(2)從草魚中提取獲得草魚肌原纖維蛋白；

(3)將提取的草魚肌原纖維蛋白酶解，得到草魚肌原纖維蛋白酶解產物；

(4)配置草魚魚鰾膠原蛋白醋酸溶液，在25-40℃、pH 6.0-7.0的條件下，加入氯化鈉溶液，與草魚肌原纖維蛋白酶解產物，進行草魚魚鰾膠原蛋白自組裝反應；

其中，所述步驟(3)中草魚肌原纖維蛋白酶解的步驟包括：

取一定量的肌原纖維蛋白，加入3倍重量的水打漿，調節溫度至50℃和pH8.0，加入3000-5000U/g復合蛋白酶進行水解，復合酶比例為α-糜蛋白酶:堿性蛋白酶:木瓜蛋白酶＝1:1:0.5，反應結束后沸水浴滅酶10min終止反應，流水冷卻至室溫，置于0℃冰箱中保存備用，所得即為草魚肌原纖維蛋白酶解產物。

2.如權利要求1所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述草魚魚鰾膠原蛋白醋酸溶液的濃度為1.0-4.0mg/mL。

3.如權利要求1所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述肌原纖維蛋白酶解產物的濃度為0.5-2.0mg/mL。

4.如權利要求1所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述氯化鈉溶液的濃度為50-100mmol/mL。

5.如權利要求1所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述步驟(1)中提取草魚魚鰾膠原蛋白的步驟包括：

將草魚魚鰾脫脂后充分水洗至中性，加入提取劑反應24-48h，離心，將上清液加入預冷氯化鈉鹽析，靜置，再離心取沉淀，上清液重復鹽析操作，合并沉淀用醋酸溶解，透析，真空冷凍干燥后保藏待用。

6.如權利要求5所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述提取劑包括醋酸和胃蛋白酶。

7.如權利要求1所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法，其特征在于，所述步驟(2)中提取獲得草魚肌原纖維蛋白的步驟包括：

將草魚魚肉剁碎后，加入預冷氯化鈉溶液進行勻漿，并置于冰浴中攪拌，過濾，離心之后，取沉淀再加入預冷氯化鈉溶液勻漿、離心，循環清洗，所得沉淀即為草魚肌原纖維蛋白。

8.一種由權利要求1～7任一所述的草魚魚鰾膠原蛋白自組裝方法得到的膠原蛋白生物原材料。