[發(fā)明專利]一種地加瑞克的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910552133.2
• 申請(qǐng)日: 2019-06-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112125956A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉自成;姚志勇;李新宇;吳峰;謝雨翔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市健元醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K7/23
• 分類號(hào): C07K7/23;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/10
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明提供了一種制備地加瑞克的方法，引入二肽片段Fmoc?Pro?D?Ala?OH，采用嗎啉/DMF脫保護(hù)試劑，可有效控制乙內(nèi)酰脲雜質(zhì)[4Aph(D/L?Hydantoinacetyl)⁵]Degarelix和[D?Pro⁹]Deagarelix雜質(zhì)。創(chuàng)造性的提供了一種操作簡(jiǎn)便、質(zhì)量易于控制、環(huán)境污染小和適合規(guī)模化生產(chǎn)的地加瑞克制備方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種地加瑞克的制備方法，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

地加瑞克(Degarelix)，商品名為Firmagon，是由丹麥輝凌(Ferring)公司開(kāi)發(fā)，于2008年12月24日被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的一種促性腺激素釋放激素(GnRH)受體抑制劑類藥物。地加瑞克主要治療對(duì)象為晚期前列腺癌患者，其機(jī)制為通過(guò)抑制對(duì)前列腺癌持續(xù)生長(zhǎng)至關(guān)重要的睪酮，從而達(dá)到延緩前列腺癌的生長(zhǎng)和惡化的目的。

地加瑞克為含有7個(gè)非天然氨基酸的線性十肽，其中5個(gè)氨基酸為D構(gòu)型的氨基酸。十肽的骨架中含有10個(gè)手性中心，序列5位的氨基酸殘基的側(cè)鏈取代基中具有另外一個(gè)手性中心，因此，整個(gè)地加瑞克中含有11個(gè)手性中心。地加瑞克結(jié)構(gòu)中第5個(gè)氨基酸Aph(Hor)的六元環(huán)L-Hor在堿性條件下極其容易發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)，生成5-乙內(nèi)酰脲-5-乙酰化雜質(zhì)4Aph(D/L-Hydantoinacetyl)⁵]Degarelix。另外，地加瑞克第9位氨基酸為脯氨酸，逐步偶聯(lián)中也極其容易產(chǎn)生脯氨酸的消旋雜質(zhì)[D-Pro⁹]Degarelix。

WO0984663為最早合成專利，報(bào)道了地加瑞克采用Boc保護(hù)氨基酸的固相合成方法。其中5位和6位的4-氨基苯丙氨酸(Aph)需要采用Fmoc保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)，然后用25％的哌啶/DMF溶液脫除，接著與L-氫化乳清酸或者叔丁基異氰酸酯反應(yīng)，再依次連接下一氨基酸，最后經(jīng)醋酸酐酰化后，用HF脫除保護(hù)基和裂解肽；另外，還提到一種方法是整個(gè)肽鏈完成之后再引入5位氨基酸側(cè)鏈上的乳清酸，采用Boc固相合成策略，其臨時(shí)保護(hù)基的脫除都是在酸性條件下(TFA)脫除，雖然可以有限避免了5位氨基酸Aph(Hor)中的Hor發(fā)生異構(gòu)化生成乙內(nèi)酰脲-5-乙酸的雜質(zhì)，但是Boc策略最終需要用HF進(jìn)行裂解，會(huì)對(duì)人和環(huán)境產(chǎn)生較大的危害。

專利CN102952174和CN102329373講述了以Fmoc保護(hù)的氨基酸為起始原料，按照固相合成的方法，用DIC/HOBt為偶聯(lián)劑進(jìn)行接肽反應(yīng)，與5位的苯丙氨酸苯環(huán)對(duì)位的氨基相連的氫化乳清酸片段先以三苯基保護(hù)，最后再引入，避免了重排副反應(yīng)發(fā)生，以D-4Aph(Cbm)代替D-4Aph(Cbm-tBu)，避免了t-Bu脫除困難，減少了副反應(yīng)的發(fā)生。5位苯丙氨酸苯環(huán)對(duì)位的氫化乳清酸放在整個(gè)肽鏈完成之后再引入，然而選擇性的脫除Trt的工藝并不穩(wěn)定，不適宜應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。

專利CN103351428報(bào)道了一種固相片段合成地加瑞克的方法，采用片段6+4的策略，選擇性的脫除第6個(gè)氨基酸殘基的X后，在其側(cè)鏈氨基上連接L-Hor，然后脫除Fmoc，與乙酰基封端的酸型片段4進(jìn)行固相偶聯(lián)，然后裂解，純化得到目標(biāo)產(chǎn)物。該路線工藝極其繁瑣，也不適合應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。

專利CN102428097中講述了采用Fmoc固相合成策略，以20％哌啶/DMF為脫保護(hù)液，逐步偶聯(lián)相應(yīng)的氨基酸，雖然5位氨基酸在20％哌啶/DMF下重排生成的乙內(nèi)酰脲雜質(zhì)可控制在0.3％重量比以下，但不能有效避免Pro的消旋雜質(zhì)[D-Pro⁹]Degarelix的產(chǎn)生。具體雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)如下：

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種制備地加瑞克的方法，以克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足。