[發明專利]一種深海微生物來源殼聚糖酶CsnA1及其應用

有效

• 申請號: 201910549992.6
• 申請日: 2019-06-24
• 公開（公告）號: CN110157698B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 楊文鈺
• 申請（專利權）人: 廣東噢美麗大健康產業有限公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12P19/26;C12R1/19
• 代理公司: 杭州知管通專利代理事務所(普通合伙) 33288
• 代理人: 黃華

本發明涉及一種深海微生物來源殼聚糖酶CsnA1及其應用。所述殼聚糖酶CsnA1氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發明提供一種殼聚糖酶CsnA1的發酵和純化方法，發酵液酶活力高達379.9 U/mL，一步純化純度95%，回收率為93.7%。本發明所述殼聚糖酶CsnA1具有嗜冷特性，最適反應溫度為25℃，在0℃，10℃，15℃下檢測活性可達到最適反應溫度下的67.6%，81.5%和89.3%。所述殼聚糖酶CsnA1降解主產物殼二糖和殼三糖，具有良好的應用潛質。

技術領域

本發明涉及一種深海微生物來源殼聚糖酶CsnA1及其應用，屬于生物技術領域。

背景技術

殼聚糖(chitosan)是由自然界廣泛存在的幾丁質(chitin)經過脫乙酰作用得到的，化學名稱為聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖。小分子的殼聚糖降解產物殼寡糖具有廣泛的抑菌、抗炎、抗腫瘤作用，被公認為有效的保健功能食品，被譽為“生命的第六元素”。殼寡糖極易溶于水，在醫藥、保健品、功能食品等領域比大分子殼聚糖有更大的應用價值。

相比傳統的酸解法，利用殼聚糖酶生物酶法降解大分子殼聚糖具有反應條件溫和、降解產物單一、反應過程容易控制、環境友好等優勢，逐漸成為殼寡糖制備過程中的主流方法。但是，目前市場上銷售的殼聚糖酶價格昂貴、活力較低，品種單一，無法滿足特定條件下的應用，因此急需開發新的殼聚糖酶。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供了一種深海微生物來源殼聚糖酶CsnA1及其制備方法。本發明所述殼聚糖酶CsnA1產量高達379.4 U/mL，一步純化純度95%，回收率為93.7%。本發明所述殼聚糖酶CsnA1具有嗜冷特性，最適反應溫度為25 ℃，在0 ℃，10 ℃，15℃下檢測活性可達到最適反應溫度下的67.6%，81.5%和89.3%。所述殼聚糖酶CsnA1降解主產物殼二糖和殼三糖，具有良好的應用潛質。

一方面，本發明提供一種新型殼聚糖酶CsnA1，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

SEQ ID NO.1：

AGHYAAGALFGPSKAAAASPDDNFSPEALQFLRNNAGLDGEQWNNIMKLINKPEQDDLNWIKYYGYCEDIEDERGYAIGLFGAAAGGSRDAHPDGPDLFKAYDAAKGASNPSADGALKRLGINGKMKGSILEIKDSEKVFCGKIKKLQNDAAWRKAMWEAFYNVYIRYSVEQARQRGFASAVAIGSFVDAALNQGAAGGSDALQGLLARSGSSSNEKAFMKNFHAKRALVVDANKYNKPPNGKNRVKQWDALVDMGKMNLKNVDSEIAQVADWEMK

另一方面，本發明還提供一種殼聚糖酶CsnA1對應的核酸序列，如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：