[發明專利]UPLC-MS法鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分

在審

• 申請號: 201910542068.5
• 申請日: 2019-06-21
• 公開（公告）號: CN112114056A
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發明（設計）人: 黃勤挽;耿福能;覃藝;譚瑾;沈詠梅;高永翔;曾海蓉
• 申請（專利權）人: 好醫生藥業集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法為超高效液相高分辨飛行時間質譜法UPLC-Q-tof-MS，具體色譜條件與質譜條件如下：

a.色譜條件

色譜柱：BEH C18，2.1*100mm，1.7um，Waters；流動相：A為乙腈，B為0.1％甲酸水；柱溫：45℃；流速：0.40mL/min；進樣體積：1uL；進行梯度洗脫；

b.質譜條件

電離模式：電噴霧電離，正離子模式/負離子模式；毛細管電壓：2.0kv；錐孔電壓：40V；離子源溫度：120℃；脫溶劑溫度：400℃；脫溶劑氣流速度：800L/hr；掃描模式：MSe；碰撞能范圍：25-45ev。

2.根據權利要求1所述的一種鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法中色譜條件的梯度洗脫程序為：

3.根據權利要求1所述的一種鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法篩選并鑒定出桂枝芍藥知母湯中28個化合物，分別為：蘋果酸、檸檬酸、麻黃堿、沒食子酸、偽麻黃堿、3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid、新芒果苷、兒茶素或表兒茶素、芍藥內酯苷、芒果苷、芍藥苷、升麻素苷、異佛萊心苷、芹糖甘草苷、甘草苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、知母皂苷E1、知母皂苷N、知母皂苷B2、知母皂苷D、異甘草苷、甘草素、知母皂苷C、22β-acetoxyglycyrrhiz in、Licoricesaponin E2、知母皂苷I、Licoricesaponin G2、甘草酸。

4.根據權利要求1所述的一種鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的桂枝芍藥知母湯的樣品制備方法為：

①稱取桂枝、白芍、甘草、麻黃、知母、生姜、白術、防風、炮附片飲片，加純凈水浸泡，武火煮沸，文火微沸至400mL，過濾，冷凍干燥，制得桂枝芍藥知母湯物質基準；

②取桂枝芍藥知母湯物質基準凍干粉加水溶解后，加乙醇，放置24h后，取上清液濃縮至無醇味，制得桂枝芍藥知母湯凍干粉。

5.根據權利要求1所述的一種鑒定桂枝芍藥知母湯中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的桂枝芍藥知母湯的樣品制備方法為：

①稱取桂枝、白芍、甘草、麻黃、知母、生姜、白術、防風、炮附片飲片，加純凈水1400mL，浸泡30min，武火煮沸，文火微沸至400mL，200目紗布雙層過濾，冷凍干燥，制得桂枝芍藥知母湯物質基準；

②取桂枝芍藥知母湯物質基準凍干粉加水溶解后，95％乙醇至75％，放置24h后，取上清液濃縮至無醇味，制得桂枝芍藥知母湯凍干粉。