[發明專利]抗CD73抗體及其應用

在審

• 申請號: 201910532994.4
• 申請日: 2019-06-19
• 公開（公告）號: CN112111008A
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發明（設計）人: 王海彬;周雅瓊;高棟
• 申請（專利權）人: 海正生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K16/40;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京信諾創成知識產權代理有限公司 11728
• 代理人: 陳悅軍

本發明屬于生物醫藥領域，提供一種抗CD73抗體或其抗原結合片段的制備和使用，所述抗體包含H CDR1、H CDR2和H CDR3，以及L CDR1、L CDR2和L CDR3；H CDR1的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17所示，H CDR2的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18所示，H CDR3的序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:19所示，L CDR1的序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:21所示，L CDR2的序列如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:22所示，L CDR3的序列如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:23所示。本發明的抗CD73抗體能夠特異性結合CD73，抑制CD73的酶活性。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及抗體的制備和使用。

背景技術

CD73又稱胞外-5’-核苷酸酶，是通過糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定于質膜的一種糖蛋白，廣泛表達于人體內皮細胞、淋巴細胞，有助于將具有免疫激活作用的ATP轉化為具有免疫抑制作用的腺苷。腺苷作為信號傳導分子可由多種受體(包括A1，A2A，A2B及A3)介導其生物學效應，如腺苷與腺苷受體A2AR(adenosine receptor AR)結合可抑制T細胞的免疫作用，進而幫助癌細胞逃逸T細胞的“追殺”。腫瘤細胞也可以表達CD73并釋放腺苷，從而降低抗腫瘤活性，除了抑制免疫細胞功能，越來越多的研究表明CD73也可以直接刺激腫瘤細胞增殖，遷移和侵襲，及腫瘤血管生成。由此可見，CD73和其他調節免疫應答的靶點比較，靶向CD73有著“一箭雙雕”的優勢。

臨床前研究表明，靶向CD73能夠產生良好的抗腫瘤作用，可通過增加T淋巴細胞和腫瘤白細胞總數改變腫瘤免疫微環境，還可減少腫瘤骨髓源性抑制細胞(MDSC)，使有應答大鼠的巨噬細胞朝著活化(抗腫瘤)表型轉變。且將CD73阻斷治療與其它免疫分子調節劑聯合(如PD-(L)1抗體)可以顯著增強如CD73單抗的抗腫瘤效果，這對增強本企業的抗腫瘤產品線也是極具吸引力的選擇。

對臨床腫瘤樣本的分析顯示，CD73高表達是一種潛在的生物標志物，在多種不同的腫瘤上表達，與多種類型腫瘤的不良預后密切相關，包括乳腺癌、肺癌、卵巢癌、腎癌、胃癌、頭頸癌等。另外，PD-1/CD73單抗、放化療等治療方案可能引起腫瘤微環境CD73表達升高，繼而通過腺苷信號抑制免疫反應，使治療大打折扣，也就是我們常說的獲得性耐藥。因此，靶向CD73的治療策略有潛力作為單藥或聯合療法應用于臨床。

鑒于對靶向疾病(如癌癥)的治療仍有較迫切的改進需求，通過多種機制調控腫瘤進展的方法以及調控CD73活性的方法及相關治療劑是非常令人期望的。

發明內容

本發明的目的是提供一種抗CD73抗體或其抗原結合片段，所述抗體或其抗原結合片段特異性識別并結合CD73，并且具有預期功能特性，這些特性包括高親和力結合至CD73并且抑制CD73酶活性的能力。本文所述的抗體可用于抑制腫瘤生長，減少腺苷產生，刺激免疫反應及檢測樣品中的CD73蛋白。

在第一個方面，本發明提供抗CD73抗體或其抗原結合片段，所述抗體包含重鏈可變區和輕鏈可變區，其中，所述重鏈可變區包含H CDR1、H CDR2和H CDR3，所述輕鏈可變區包括L CDR1、L CDR2和L CDR3；

所述H CDR1的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17所示，或者所述HCDR1的序列與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；