[發明專利]一種龍脷葉總黃酮的制備方法

有效

• 申請號: 201910530831.2
• 申請日: 2019-06-19
• 公開（公告）號: CN110251552B
• 公開（公告）日: 2021-06-15
• 發明（設計）人: 張健;劉江云;李蒙;黃曉雷;趙磊;李晶晶;陳晶磊;陳喜華;謝蓮;蔣小崗
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;A61K36/47;A61K31/7048;A61P3/10;C07H17/07;A61K127/00
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

本發明公開了一種龍脷葉總黃酮的制備方法，選取龍脷葉藥材的干燥葉，用95％乙醇加熱回流提取，獲得龍脷葉的提取液；將龍脷葉的提取液減壓回收，濃縮至無醇味，獲得龍脷葉醇提浸膏；將龍脷葉醇提浸膏與去離子水攪拌均勻，混懸過濾，獲得龍脷葉醇提上清液，將龍脷葉醇提上清液用石油醚萃取，獲得龍脷葉萃取水層；龍脷葉萃取水層經ODS減壓柱層析，以甲醇?水系統梯度洗脫，獲得龍脷葉總黃酮。本發明方法其方法簡單、對實驗材料要求低，易操作；龍脷葉總黃酮具有α?葡萄糖苷酶的抑制活性，總黃中的六個黃酮化合物具有α?葡萄糖苷酶的抑制活性，并且對正常肺泡細胞安全，可以用于抗糖尿病藥物的制備，用于糖尿病患者的輔食。

技術領域

本發明具體涉及一種龍脷葉總黃酮的制備方法。

背景技術

龍脷葉(Sauropus spatulifolius Beille)系大戟科守宮木屬植物，又名龍舌葉、龍耳葉，原產于越南北部，馬來半島有栽培，在我國多分布于福建、廣東、廣西等地。民間地區常將龍脷葉作為食療藥材使用，其味甘、淡，性平，有清肺除熱、化痰止咳的功效，用于治療肺燥咳嗽、氣管炎、支氣管炎及便秘等疾病，龍脷葉中含有豐富的有效物質，但是目前市場上對此塊研究不多，一些研究者通過化學反應鑒別龍脷葉可能含有糖、皂苷、鞣質、有機酸，生物堿、香豆素等化學成分，另一些研究學者從龍脷葉的乙醇提取物中分離得到β-谷甾醇油酸酯、β-谷甾醇、1，3-十四烷酸甘油二酯、月桂酸、鄰苯二甲酸二丁酯、豆甾醇、槲皮素、山柰酚、己糖衍生物等化合物。還有一些研究學者藥理研究表明，龍脷葉對化學刺激引起的疼痛有明顯抑制作用，對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠致大鼠足腫脹和棉球致小鼠肉芽腫等炎癥模型具有抗炎活性，以及抗急性肺損傷活性，DPPH自由基清除活性，抗菌等作用，并且，龍脷葉安全、無毒，廣東廣西等民間地區常將其作為食療藥材使用。但是龍脷葉的化學成分及其藥效物質不明確，仍有待進一步深入研究。

發明內容

本發明目的是提供一種龍脷葉總黃酮的制備方法，解決上述問題。

本發明的技術方案是：

一種龍脷葉總黃酮的制備方法，其特征在于，包括步驟：

(1)選取龍脷葉藥材的干燥葉，用95％乙醇加熱回流提取，獲得提取液，所述提取次數為兩次，每次提取2小時，將兩次獲得的所述提取液冷卻至室溫，過濾合并，獲得龍脷葉的提取液；

(2)將所述龍脷葉的提取液減壓回收，濃縮至無醇味，獲得龍脷葉醇提浸膏；

(3)將所述龍脷葉醇提浸膏與去離子水攪拌均勻，混懸過濾，獲得龍脷葉醇提上清液，將所述龍脷葉醇提上清液用石油醚萃取，保留萃取得到的水層，經減壓濃縮，獲得龍脷葉萃取水層；

(4)所述龍脷葉萃取水層經ODS減壓柱層析，以甲醇-水系統梯度洗脫，30％甲醇洗脫去除雜質，收集50％甲醇洗脫液，回收溶劑，獲得龍脷葉總黃酮。

進一步的，步驟(1)中所述干燥葉與95％乙醇的質量比為1：10。

進一步的，步驟(3)中所述龍脷葉醇提浸膏與去離子水的質量比為1：1.5。

進一步的，步驟(3)中所述龍脷葉醇提浸膏與去離子水的質量比為1：1.5。

進一步的，還包括步驟(5)：所述龍脷葉總黃酮經ODS減壓柱層析，分別以35％甲醇，50％甲醇洗脫，得到35％甲醇洗脫物和50％甲醇洗脫物，將所述35％甲醇洗脫物用75％乙醇溶解，經凝膠Sephadex LH-20柱、75％乙醇洗脫，獲得山柰酚-3-O-β-D-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-β-D-龍膽二糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，將所述50％甲醇洗脫物用高效液相色譜柱檢測，流速為10ml/min，檢測波長為254nm，45％甲醇洗脫，獲得山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖(1-6)-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷，再用50％甲醇洗脫，獲得化合物山柰酚-3-O-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷。