[發明專利]一種與大豆植株分枝數顯著相關的InDel標記及其應用

有效

• 申請號: 201910529784.X
• 申請日: 2019-06-19
• 公開（公告）號: CN110117674B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發明（設計）人: 王曉波;萬明月;張陰;王偉;邵文韜;程安東;李佳佳;付廣輝;張玉坤;邱麗娟
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 劉海涵

1.一種與大豆植株分枝數顯著相關的InDel標記，其特征在于，所述InDel標記位于SEQID NO.7所示核苷酸序列的8-19位上，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1：TGTCTGTGAAGT。

2.權利要求1所述的InDel標記在鑒定大豆植株分枝數中的應用。

3.用于擴增權利要求1所述InDel標記的引物對，其特征在于，所述引物對的序列具體為：

1F：GCAAATCTGTCTGTGAAGTACG SEQ ID NO.2

1R：TATCCGAATTGCAAAAGCGCA SEQ ID NO.3。

4.權利要求3所述的引物對在鑒定大豆植株分枝數中的應用。

5.一種雙引物對快速鑒定大豆植株分枝數多少的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

步驟1、設計鑒定待測大豆基因組DNA是否有缺陷的引物對

2F：GTGTCATTCCTGGCATACAAAAGT SEQ ID NO.4

2R：TAATGCCTCCTGCCCTGTTG SEQ ID NO.5

步驟2、提取待測大豆基因組DNA

步驟3、以SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5構成的引物對組，對步驟2提取的待測大豆基因組DNA進行PCR擴增，獲得擴增產物；

步驟4、對PCR擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳，若擴增產物僅含1條主帶，則對應待測大豆DNA沒問題且植株分枝數多；若擴增產物包含兩條主帶，則對應待測大豆DNA沒問題且植株分枝數少。

6.根據權利要求5所述的雙引物對快速鑒定大豆植株分枝數多少的方法，其特征在于，步驟3中PCR擴增體系為：2.0μL 100ng/μL的模板DNA、10μM的引物各1.0μL，1.0U Primestar Max酶12.5μL，ddH2O 8.5μL；反應條件為：94℃變性2min，98℃變性10s，62℃,降落-0.2℃，退火15s，72℃延伸19s，共循環38次；最后72℃延伸8min，4℃保存。

7.含有權利要求3所述引物對的檢測試劑或試劑盒。