[發明專利]一種殼聚糖酶CsnT及其應用

有效

• 申請號: 201910529359.0
• 申請日: 2019-06-19
• 公開（公告）號: CN110195047B
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 楊文鈺
• 申請（專利權）人: 棗莊全鼎生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12P19/26
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種殼聚糖酶CsnT及其應用。所述內切殼聚糖酶CsnT氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發明提供一種殼聚糖酶CsnT的發酵和純化方法，發酵液酶活力高達796.3 U/mL，一步純化純度95%，回收率為88.9%。本發明所述殼聚糖酶CsnT性質穩定，在50℃孵育1 h可保持52.4%的酶活力，降解主產物殼二糖和殼三糖，具有良好的工業化應用潛質。

技術領域

本發明涉及一種殼聚糖酶CsnT及其應用，屬于生物技術領域。

背景技術

殼寡糖被譽為“生命的第六元素”，具有廣泛的抑菌、抗炎、抗腫瘤作用，被公認為有效的保健功能食品。殼寡糖由N-乙酰-D-氨基葡萄糖（GLcNAc）和D-氨基葡萄糖（GLcN）通過β-l,4-糖苷鍵連接而成，極易溶于水，在醫藥、保健品、功能食品等領域比大分子殼聚糖有更大的應用價值。

利用殼聚糖酶生物酶法降解大分子殼聚糖具有反應條件溫和、降解產物單一、反應過程容易控制、環境友好等優勢，逐漸成為殼寡糖制備過程中的主流方法。但是，目前市場上銷售的殼聚糖酶價格昂貴、活力較低，且穩定性較差，嚴重限制了殼聚糖酶的應用前景。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供了一種殼聚糖酶CsnT及其制備方法。本發明所述殼聚糖酶CsnT產量高達796.3 U/mL, 最適反應溫度為50 ℃，在40 ℃孵育1 h可保持65.5%的酶活力，在50 ℃孵育1 h可保持52.4%的酶活力。降解主產物為殼二糖和殼三糖。本發明所述殼聚糖酶CsnT產量高、制備方法簡單、純度高、穩定性好，具有良好的工業化應用潛質。

一方面，本發明提供一種殼聚糖酶CsnT，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

SEQ ID NO.1：

SKLVSGAPVPNLRTRTVAVAVGGVHKLIASGAIAGTAAQANAVSSLAPAITAVSAASTGDLSAPAKKEIAMQLVCSAENSSLDWKAQYGSGTGDMLELVQNYANTKPDYIEDIDEDRGYTGGIIGFTNNVLKPFLPVLRKVNGTKSHEGLGQKYVDAWHQAAKDSVFLKEQDKVRDSMYFNPRKVSQGKSDGLSNLGQFMYYDAIFMHGPGDSSDSFGGIRKSAMKNAKTPAQGGDEKTYLQAFATARKKIMKQENAHSDTSRVRTVDAQLKFLNEGNYDLHTPLKWKVYGDPYEIK

另一方面，本發明還提供一種殼聚糖酶CsnT對應的核酸序列，如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：