[發明專利]一種基于核酸適配體和納米金的Hg2+檢測方法

有效

• 申請號: 201910523669.1
• 申請日: 2019-06-17
• 公開（公告）號: CN110412024B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 王麗;劉傳;遲恩忠;張強;曾浩楠;姚娜;胡楚玲
• 申請（專利權）人: 廣東石油化工學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 合肥匯融專利代理有限公司 34141
• 代理人: 鄺溯瓊

1.一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于，所述Hg²⁺檢測方法包括以下步驟：

（1）核酸適配體的設計：設計由28個堿基組成的單鏈DNA為核酸適配體，其中單鏈DNA為5′末端和3′末端相靠近的莖環發夾結構，其中所述單鏈DNA從5′末端至3′末端的序列為GAACACCCCTTCTTCTTCCTTGTTGTTC；

（2）標準液的制備：將納米金溶液和10μmol/L的核酸適配體混勻，于室溫下進行孵育，得標準液備用；

（3）實驗組設立：向上述標準液中加入待檢測含Hg²⁺樣本溶液，混勻后加入1mol/L的氯化鈉溶液，再補充緩沖液至核酸適配體濃度為0.32μmol/L，混勻后形成實驗組備用；

（4）檢測：將上述實驗組在室溫條件下孵育一段時間，并觀察體系的顏色變化，進行定性檢測，測定520nm、620nm處的吸光度；

（5）建立標準曲線，確定最低檢出限和線性范圍；

（6）根據標準曲線對實驗組進行定量分析。

2.根據權利要求1所述的一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于：所述納米金選用的粒徑為15nm。

3.根據權利要求1所述的一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于：所述步驟（2）中納米金溶液與核酸適配體混合的體積比為25∶2，且室溫孵育的時間為5min。

4.根據權利要求1所述的一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于：所述步驟（3）中氯化鈉的加入量為納米金溶液體積的3/10，待檢測含Hg²⁺樣本溶液的加入量為納米金溶液體積的1/6，添加緩沖液后氯化鈉濃度為0.12mol/L，且所選用的緩沖液為pH7.4的磷酸緩沖體系。

5.根據權利要求1所述的一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于：所述步驟（4）中室溫孵育的時間為15min，且體系顏色變化為從紅色至藍色的變化，定性檢測的方式為將孵育后的溶液于1cm比色皿中常溫檢測。

6.根據權利要求1所述的一種基于核酸適配體和納米金的Hg²⁺檢測方法，其特征在于：所述步驟（5）中標準曲線中橫坐標為Hg²⁺的濃度，縱坐標為620nm處的吸光度與520nm處的吸光度的比值。