[發明專利]用于鑒定莢膜紅細菌的特異性PCR引物、試劑盒和用途有效
| 申請號： | 201910516176.5 | 申請日： | 2019-06-14 |
| 公開（公告）號： | CN110241236B | 公開（公告）日： | 2022-11-11 |
| 發明（設計）人： | 周輝;田云;劉成國;段希宇;王晶晶 | 申請（專利權）人： | 湖南農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 長沙啟昊知識產權代理事務所(普通合伙) 43266 | 代理人： | 張海應 |
| 地址： | 410128 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 鑒定 莢膜 細菌 特異性 pcr 引物 試劑盒 用途 | ||
1.一種用于鑒定莢膜紅細菌的特異性PCR引物，其特征在于，包括如下引物對：
SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的引物對；
SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的引物對；
及SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的引物對；
所述特異性PCR引物對莢膜紅細菌特異性強。
2.一種試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的特異性PCR引物、Taq DNA聚合酶、dNTP和DNA模板。
3.如權利要求1所述的特異性PCR引物或權利要求2所述的試劑盒在鑒定莢膜紅細菌中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述應用的方法包括如下步驟：
S1、提取待測樣品的總DNA；
S2、采用權利要求1所述的三對特異性PCR引物分別對所述總DNA進行PCR擴增；
S3、對步驟S2擴增的產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述待測樣品選自光合細菌單菌落或光合細菌菌劑產品。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述PCR的擴增體系中包括：Taq DNA聚合酶0.5μL，dNTP 0.5μL，上、下游引物各0.5μL，DNA模板100ng。
7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述PCR的擴增過程中包含退火過程，所述退火過程的條件為：52～56℃下退火1min。
8.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，在步驟S3所得到的瓊脂糖凝膠電泳圖中，若泳道上出現1條條帶，則判斷所述待測樣品來自莢膜紅細菌；若泳道上未出現條帶，則判斷所述待測樣品不是來自莢膜紅細菌。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，若泳道上出現1條條帶，PCR擴增的DNA片段的長度為300bp。
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