[發(fā)明專利]一種人血漿中卡托普利的LC-MS/MS檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910509420.5
• 申請(qǐng)日: 2019-06-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110243963A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊勇;陳濤;陳云輝;鐘勘;陳醒;鄒小芳;史中杰;張嘉懿;譚文娟;姜金方;周茂金;陳笑艷;鐘大放
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州海科醫(yī)藥技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 蘇州唯亞智冠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32289
• 代理人: 張翠茹

1.一種人血漿中卡托普利的LC-MS/MS檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：樣品前處理，采集血樣約3mL于含50μL維生素C溶液的抗凝管中，離心獲得血漿樣品，取500μL血漿樣品，混入100μL對(duì)溴苯甲酰甲基溴溶液，反應(yīng)10min后血漿置于-80℃冰箱保存待測(cè)；取50μL待測(cè)血漿樣品，混入內(nèi)標(biāo)溶液，內(nèi)標(biāo)溶液為乙腈配制成的同位素標(biāo)記物卡托普利-d3濃度為200ng/mL的溶液，再加入乙腈后渦流振蕩10min后離心，取上清液進(jìn)行LC-MS/MS分析；所述內(nèi)標(biāo)溶液為乙腈配制成的同位素標(biāo)記物卡托普利-d3濃度為200ng/mL的溶液；

S2：采用LC-MS/MS法測(cè)定待測(cè)樣品中卡托普利的濃度；

I.色譜條件：色譜柱：100×4.6mm，3.5μm；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：2μL；流動(dòng)相A：含有0.2％甲酸的2mM醋酸銨水溶液；流動(dòng)相B：乙腈，采用體積比為35：65的A：B相等梯度洗脫，自動(dòng)進(jìn)樣器溫度為4℃，流動(dòng)相的流速為1.1mL/min，其中柱后分流0.4mL/min進(jìn)入質(zhì)譜；

II.質(zhì)譜條件：離子源：電噴霧電離源ESI；噴霧電壓5500V；離子源溫度：600℃；CUR：40psi；掃描模式：正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)+MRM，卡托普利和卡托普利-d3離子反應(yīng)分別為m/z414.4→216.2和m/z 417.1→219.2，碰撞能量CE分別為23和25eV；

S3：標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的配制，稱取卡片托普利以甲醇溶解并定容，配制成濃度約為1.00mg/mL的貯備液，以乙腈：水逐級(jí)稀釋得到標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液，以人空白血漿稀釋該工作溶液，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品，完成后立即向標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品中加入維生素C和對(duì)溴苯甲酰甲基溴溶液，反應(yīng)10min后，以上述步驟S1的處理方法和LC-MS/MS條件檢測(cè)，并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果繪制相應(yīng)的卡托普利的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人血漿中卡托普利的LC-MS/MS檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S1中所述的維生素C溶液為1.5mol.L-1水溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人血漿中卡托普利的LC-MS/MS檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S1中所述的對(duì)溴苯甲酰甲基溴溶液為2.00mg/mL乙腈溶液。