[發明專利]檢測新城疫病毒抗體的多肽及其ELISA檢測試劑盒有效
| 申請號: | 201910496410.2 | 申請日: | 2019-06-10 |
| 公開(公告)號: | CN110240635B | 公開(公告)日: | 2022-04-22 |
| 發明(設計)人: | 張安定;成澤;任海洋 | 申請(專利權)人: | 華中農業大學 |
| 主分類號: | C07K14/125 | 分類號: | C07K14/125;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司: | 武漢開元知識產權代理有限公司 42104 | 代理人: | 王和平;馮超 |
| 地址: | 430070 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 新城 疫病 抗體 多肽 及其 elisa 試劑盒 | ||
1.一種檢測新城疫病毒抗體的多肽,其特征在于:所述多肽為NDV-H4,其氨基酸序列為RYNDTCPDEQDYQIRMAKSSYKPGRFGGKRIQQAILS,如SEQ ID NO.5所示。
2.一種檢測新城疫病毒抗體的ELISA檢測試劑盒,其特征在于:所述ELISA檢測試劑盒包含有與牛血清白蛋白偶聯的權利要求1所述多肽的酶標板。
3.根據權利要求2所述檢測新城疫病毒抗體的ELISA檢測試劑盒,其特征在于:所述ELISA檢測試劑盒還包括辣根過氧化物酶標記的羊抗雞Igγ,血清稀釋液,洗滌液,標準陽性對照,陰性對照,底物液A,底物液B、封閉液和終止液;其中,
所述洗滌液每升中含有KH2PO4 0.2g,Na2HPO4·12H2O 2.9g,NaCl8.0g,KCl 0.2g,Tween-20 0.5mL;
所述封閉液:脫脂乳5g,加洗滌液至100mL;
所述血清稀釋液:牛血清白蛋白2g,脫脂乳5g,加洗滌液至100mL;
所述酶標抗體:將辣根過氧化物酶標記的羊抗雞Igγ使用血清稀釋液稀釋8000倍制備;
所述底物液A:0.2M Na2HPO4 25.7mL,0.1M檸檬酸24.3mL,加蒸餾水至50mL,使用前加入3%H2O2 150μL;
所述底物液B:0.2M Na2HPO4 25.7mL,0.1M檸檬酸24.3mL,加蒸餾水至50mL,使用前加入2mg/mL的TMB乙醇溶液2.5mL;
所述終止液:2.5mL氫氟酸加到900mL注射用水中,并定容至1000mL;
所述標準陽性對照:新城疫疫苗免疫SPF雞制備的血清,其血凝抑制效價為10log2;
所述陰性對照:一月齡SPF雞采集的血清。
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