[發明專利]一種用于他汀類藥物個體化基因檢測的探針組及試劑盒有效
| 申請號: | 201910485737.X | 申請日: | 2019-06-05 |
| 公開(公告)號: | CN110157797B | 公開(公告)日: | 2020-05-05 |
| 發明(設計)人: | 黃拔嚴;張彥偉 | 申請(專利權)人: | 北京益序醫療科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6883 | 分類號: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京智行陽光知識產權代理事務所(普通合伙) 11738 | 代理人: | 黃錦陽 |
| 地址: | 100000 北京市昌平區*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 類藥物 個體化 基因 檢測 探針 試劑盒 | ||
1.一種用于他汀類藥物個體化基因檢測的試劑盒,其特征在于:包括30ng/ul探針組300ul、封閉液800ul、雜交緩沖液800ul、結合緩沖液3.2ml、漂洗緩沖液9ml、洗脫緩沖液500ml和PCR反應液580ul;所述封閉液為每20ul包含5ul購自Invitrogen的人cot-1DNA和10ul濃度為1nmol/ul的特異性封閉引物混合液,所述特異性封閉引物分別為:引物1 :AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCT ,引物2 :CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGTCTCGGCATTCCTGCTGAACCGC;所述雜交緩沖液為5 倍濃度的SSPE,5mM EDTA和1%SDS 混合液;所述結合緩沖液為1M NaCl,10mM Tris-HClpH7.5和1mM EDTA混合液;所述漂洗緩沖液為0.5倍濃度的SSC溶液和0.1%SDS混合液;所述PCR 反應液為2ul dNTPs,每種10mM,0.5ul 引物3:AATGATACGGCGACCACCGAG,50pmol,0.5ul 引物4:CAAGCAGAAGACGGCATACG*A,50pmol,20ul 5倍濃度的Phusion 緩沖液,1ul HotstartPhusion 酶,購自New England Biolabs,5ul DMSO和51ul dH2O混合液;所述洗脫緩沖液為10mM Tris-HCl和1mM EDTA混合,調pH 至8.0,水定容至500ml;所述探針組由如下探針組成:探針1:CCAGACATCTGACTCCCAGCATGAACGGTCCCAACTCCTCTCTAACAAAAG,探針2:TCTGGGTCATACATGTGGATATATGCGTTCATGGGTAATATGCTTCGTGGA,探針3:TCTACCACAACTTTCCCACAAATCAAGCTCACATCAATTTCTTGAGTTGCT,探針4:GAGCCCCAGGAACTGGAGCGAAAGTAAGATTTGCCCCATGAGGAAAAGCTG,探針5:CCGCGATGCCGATGACCTGCAGAAGCGCCTGGCAGTGTACCAGGCCGGGGC,探針6:GTCGATGTTGAATTTTCTGATGAATAGATATTAGTTTCTTTAGAATACCTG,探針7:ATGATTCCTGGACTGCGTCTGGAACAAAGACTCTTCTATTAATATGATTGT,探針8:CACTCTGACGGTGAGAGAAAACTTAAAGTTCTCAGCAGCTCTTCGGCTTGC,探針9:ATAGCGCCACCCAAACCAGTCCTACCGTTATAAAAGCAAATCAAAGCACTC,探針10:ACTACATCTCAAAAAAAAATTTTTTAAAATCCTTTATATTACAATCATACT,探針11:GAAAGATAAGAAAGAACTAGAAGGTACTGGGAAGGTGAGTCAAACTAAATA,探針12:ATATATATGTGCATATGTGTATACAAGTAAAAGTGTGTATATATGTATACA。
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