[發明專利]產多種酶類的解淀粉芽孢桿菌菌株GUTU06及其篩選方法

有效

• 申請號: 201910484374.8
• 申請日: 2019-06-05
• 公開（公告）號: CN110438027B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 何臘平;蘭光群;李翠芹;楊運;黃露
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12N9/54;C12R1/07
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

本發明公開了一種產多種酶類的解淀粉芽孢桿菌菌株GUTU06及其篩選方法。本發明已從傳統發酵的豆豉中篩選出的天然的產納豆激酶、蛋白酶、β?葡萄糖苷酶、淀粉酶等多酶新菌株，利用該菌株來發酵黃豆制備納豆，制備獲得的納豆具有預防心腦血管疾病、助消化和轉化銀杏黃酮苷等功能；同時提供了一種新的同時生產納豆激酶、蛋白酶、β?葡萄糖苷酶、淀粉酶的培養方法，且安全性高；由于黃豆來源廣泛，價格適中，降低納豆激酶、蛋白酶、β?葡萄糖苷酶、淀粉酶的生產成本；另外提供了一種從豆豉中提取納豆激酶的簡單純化方法。因此該解淀粉芽孢桿菌具有很好的應用前景。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，尤其涉及一種產多種酶類的解淀粉芽孢桿菌菌株GUTU06及其篩選方法。

背景技術

納豆是一種傳統的發酵豆制食品，通過用枯草芽孢桿菌發酵大豆而制備，具有獨特的風味和粘性。在納豆發酵和后熟過程中，產生了如蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、糖化酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶等多種酶類，這些酶類的存在和作用顯著地影響著納豆的風味和品質。其中，在蛋白酶的作用下，大豆蛋白被降解為較小的氮化合物，例如肽、氨基酸、胺和氨類物質，不僅增強其營養性，使人體更易吸收，同時這些小分子化合物含量的增加使其風味更突出。同時，淀粉酶水解大豆中的淀粉生成糊精、麥芽糖，最終生成葡萄糖，葡萄糖經發酵,又可產生多種低分子物質，如乙醇、乙醛、乙酸、乳酸等，這些物質既是形成納豆風味的組分，又可與其他物質作用生成色素及酷類等香氣成分。β-葡萄糖苷酶屬于纖維素酶類，它能夠參與生物體的糖代謝，在納豆發酵中，不利于人體的消化吸收的大豆異黃酮經β-葡萄糖苷酶催化水解可轉化成為高活性的大豆異異黃酮苷元，對維持生物體的正常生理功能起著重要作用。在微生物及各種酶類的相互作用下，大豆成分被分解產生各類活性物質，使納豆成為具有多種生理活性的功能性保健食品。

納豆激酶-納豆中最重要的一種活性物質，是一種絲氨酸蛋白酶。據報道，納豆激酶已經被證明是體外和體內有效的血栓溶解酶。作為一種天然發酵產物，與臨床使用的溶栓藥物相比，納豆激酶在治療各種血栓血管疾病方面具有更優越的有效性和安全性，在胃腸道中足夠穩定使得該酶成為口服溶栓治療的有用藥劑，此外，它還有治療高血壓，阿爾茨海默病和玻璃體視網膜疾病的巨大潛力。納豆激酶是微生物代謝產物，只要生產菌株活性穩定，工藝成熟即可實現大規模生產，且具有發酵納豆激酶的原料來源廣、生產周期短、產量高、價格低廉和易于提取等優勢，使其開發前景廣闊。而固態發酵與液體發酵相比，成本低、酶活力高、酶系豐富、設備操作簡單、易于企業擴大化生產且產率高，因此，國內外食品發酵工業化生產普遍采用這種工藝。發酵后的產品不僅可用作食品直接食用，還可以通過進一步的分離純化，制成不同類型和純度的納豆激酶膠囊。

由于納豆激酶來源于食品級微生物及其奇特功能，國內外很多學者對納豆和含納豆激酶的保健食品進行了深入開發。但是，因為發酵菌株及發酵工藝的問題，納豆具有的不愉快氣味及口感使得世界范圍上多數人們難以接受。目前，許多研究人員將突破點放在對納豆激酶菌株的分離篩選上，志在篩選出具有高效溶栓效果、發酵納豆感官性能良好且功能性豐富的優秀納豆發酵菌株，以期為預防心腦血管疾病保健品及納豆激酶的工業化生產做出貢獻。