[發明專利]白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜構建方法及其應用

有效

• 申請號: 201910475132.2
• 申請日: 2019-06-03
• 公開（公告）號: CN110118839B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 吳娜;陳云波;楊新周;楊光明;劉衛
• 申請（專利權）人: 紅河學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 西安知誠思邁知識產權代理事務所(普通合伙) 61237
• 代理人: 麥春明

本發明公開了一種白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜構建方法及其應用，指紋圖譜構建過程包括以下步驟：步驟1，制備復合固相微萃取頭；步驟2，對白花蛇舌草樣品進行前處理，使用復合固相微萃取頭萃取白花蛇舌草樣品中的揮發性成分；步驟3，使用氣相色譜?質譜聯用儀檢測白花蛇舌草中的揮發性成分；步驟4，根據檢測結果建立白花蛇舌草的揮發性成分GC/MS指紋圖譜；將構建的指紋圖譜用于白花蛇舌草種類鑒別，能夠標準化控制白花蛇舌草的質量，提高白花蛇舌草的使用效率和安全性。

技術領域

本發明屬于成分檢測技術領域，特別是涉及一種白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜構建方法及其應用。

背景技術

白花蛇舌草始載于《廣西中藥志》，莖干纖細，夏秋之間生長茂盛，多見于水田、田埂和濕潤的曠地，主要分布于我國云南、廣西、廣東、福建等地，為雙葉植物茜草科植物白花蛇舌草的帶根全草，具有抗腫瘤、抗菌消炎等藥理作用，氣微味苦甘，全草可供藥用且價格低廉。現代醫學研究證明，白花蛇舌草能增強機體的免疫力，抑制細胞的生長，是清熱解毒的良藥，由于白花蛇舌草全草可供藥用、價格低廉，也較為常見，所以被廣泛用于醫學界，白花蛇舌草是2015版藥典中收錄的花紅顆粒、男康片、抗骨髓炎片、腎炎康片、炎寧糖漿等制劑和單味制劑中的配方成分之一，隨著對白花蛇舌草研究的不斷深入，白花蛇舌草已經成為中藥材具有開發前景的品種。白花蛇舌草中含有多類化學成分，主要有蒽醌類、萜類、甾醇類、苷類、有機酸類、黃酮類和多糖類等，目前白花蛇舌草在臨床醫學應用廣泛，用于抑制腫瘤生長，據有關報道，抑制腫瘤最有效的成分為蒽醌類化合物，而其揮發性成分主要是黃酮類、萜類和有機酸化合物，其中黃酮類化合物是抗炎抗菌的主要成分。

由于白花蛇舌草功效顯著，其相關研究報道較多，目前相關報道主要集中于采用離子色譜法、液質聯用法、原子分光光度等多種方法對白花蛇舌草中的化學成分的研究，液質聯用法測定白花蛇舌草中熊果酸、齊墩果酸的含量以及快速有效的鑒定白花蛇舌草中黃酮類的化學成分，原子吸收分光光度法測定白花蛇舌草中的重金屬元素，結合超臨界萃取技術、水蒸氣蒸餾法為基礎采用GC/MS法對白花蛇舌草中的揮發性成分進行分析，結果顯示其揮發性成分以脂肪酸及脂肪酸脂為主，利用高效液相色譜法檢測出白花蛇舌草的成分主要為環烯醚苷萜類、黃酮類、甾醇類等，多種成分均具有抗腫瘤、加強吞噬細胞作用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜構建方法及其應用，本發明通過對白花蛇舌草的揮發性成分進行檢測，進而構建白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜，利用該指紋圖譜對未知產地的白花蛇舌草進行鑒別，以用于控制白花蛇舌草的質量，方便對白花蛇舌草的質量監控和使用。

本發明所采用的技術方案是，白花蛇舌草的GC/MS指紋圖譜構建方法，包括以下步驟：

步驟1，制備復合固相微萃取頭，

將對電極-鉑絲、參比電極-飽和甘汞、工作電極-不銹鋼絲浸入5mL電解液中形成三電極池工作系統，在電壓0～1.5V循環伏安范圍內以速度0.05mV/s循環掃描工作電極50圈制成復合微萃取頭；

步驟2，對白花蛇舌草樣品進行前處理，使用復合固相微萃取頭萃取白花蛇舌草樣品中的揮發性成分；

稱取白花蛇舌草干粉置于密閉的靜態頂空進樣瓶中，在120℃下攪拌的同時使用復合固相微萃取頭萃取30min，待測；

步驟3，使用氣相色譜-質譜聯用儀，對白花蛇舌草樣品中的揮發性成分進行檢測；

步驟4，根據檢測結果繪制白花蛇舌草揮發性成分的GC/MS指紋圖譜。

進一步的，所述步驟1電解液中HNO₃的濃度為1mol/L、苯胺的濃度為0.1mol/L。