[發明專利]一種海洋真菌來源的萘并吡喃酮類化合物、制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201910448403.5
• 申請日: 2019-05-21
• 公開（公告）號: CN110172410A
• 公開（公告）日: 2019-08-27
• 發明（設計）人: 陳敏;沈南星;梁朝陽;鄭瑤瑤;王長云
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C07D311/92;C12P17/06;A01N43/16;A01P3/00;A61K31/352;A61P31/04;C12R1/82
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本發明涉及一種海洋真菌來源的萘并吡喃酮類化合物、制備方法及其應用，所述萘并吡喃酮化合物具有化合物1?3所示的結構：

技術領域

本發明屬于海洋真菌次級代謝產物領域，具體涉及一種海洋真菌來源的萘并吡喃酮類化合物、制備方法及其應用。

背景技術

萘并吡喃酮骨架結構是真菌次級代謝產物中一類重要化合物，其表現出多種生物活性，例如細胞毒、酶抑制等。本發明提供一種利用海洋真菌Penicillium sp.HK1-22制備得到系列萘并吡喃酮化合物及其二聚體，并對其進行了抗耐藥致病菌及抗真菌活性測試。

發明內容

本發明所述海洋真菌Penicillium sp.HK1-22的菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2018年6月11日；保藏編號：CGMCC No.15865；分類命名：青霉Penicillium sp.。

本發明提供一種萘并吡喃酮化合物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于所述萘并吡喃酮化合物具有化合物1-3所示的結構：

本發明的另一實施方案提供一種由海洋真菌Penicillium sp.HK1-22制備化合物1-5的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)先在菌種培養基中對海洋真菌Penicillium sp.HK1-22進行菌種培養；

(2)再在發酵培養基中對步驟(1)中的海洋真菌Penicillium sp.HK1-22進行發酵培養；

(3)將步驟(2)發酵培養后得到的發酵物中的發酵液和菌體分離，發酵液用有機溶劑A萃取2～4次，合并萃取液后減壓濃縮得到發酵液浸膏；菌體用有機溶劑B浸提2～4次，合并浸提液后減壓濃縮得到菌體浸膏；合并發酵液浸膏和菌體浸膏，經色譜分離和/或重結晶得到化合物1-5；

化合物1-5的結構如下：

本發明制備方法中涉及洗脫劑、流動相等比例的均指體積比；所述色譜分離為本領域常規的色譜分離技術，優選正相硅膠柱層析、反向硅膠柱層析、LH-20凝膠柱層析、高效液相HPLC制備中的一種或幾種結合；所述重結晶為本領域常規的重結晶技術。

其中所述菌種培養基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、瓊脂、粗海鹽、水，發酵培養基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、粗海鹽、水。

本發明上述制備方法中，所述的有機溶劑A優選乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一種或幾種；所述的有機溶劑B優選甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一種或幾種。

本發明上述制備方法中菌種培養基優選含有葡萄糖0.1％-10.0％、酵母膏0.01％-5％、蛋白胨0.01％-5％、瓊脂0.1％-6.0％、粗海鹽0.05％-10％，適量的水；進一步優選含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-2％、蛋白胨0.01％-2％、瓊脂0.1％-3.0％、粗海鹽0.05％-5％；上述百分比均為重量百分比；培養溫度優選為0-45℃，進一步優選5-30℃，更進一步優選15-25℃；培養時間優選為2-10天，進一步優選為3、5、7天。發酵培養基優選含有葡萄糖0.1％-10.0％、酵母膏0.01％-5％、蛋白胨0.01％-5％、粗海鹽0.05％-10％，適量的水；進一步優選含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-2％、蛋白胨0.01％-2％、粗海鹽0.05％-5％；上述百分比均為重量百分比；培養溫度優選為0-45℃，進一步優選5-30℃，更進一步優選10-25℃；培養時間優選為20-40天，進一步優選21、24、28、30、32、35天。